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(無題) 削除/引用 No.11545-2 - 2023/06/22 (木) 16:44:56 - G25 まず最初に界面活性剤で洗うのは、単に夾雑物を可能な限り洗い流して、目的タンパク質をなるべくきれいにするってだけのことでしょう。 洗って除ける夾雑物があるなら、純度を上げるチャンスなのだからスルーするのは賢くない。 >大腸菌由来のプロテアーゼなどを可溶化して除去してから, 可溶化するというほど大げさじゃなくて、物を洗うときに界面活性剤を入れたほうが洗浄効果が高いという意味以上のことはないように思います。 封入体を沈殿したときに可溶性、懸濁性はそれほど低くないのに共沈してしまうタンパク質や細胞のデブリなども相当ありますから。

封入体を界面活性剤で洗う理由について 削除/引用 No.11545-1 - 2023/06/22 (木) 15:27:44 - あつ 大腸菌発現精製系において, 封入体形成時に界面活性剤を用いて沈殿に含まれる大腸菌由来のプロテアーゼなどを可溶化して除去してから, カオトロープを用いて封入体の可溶化を行うプロトコルを見つけました。 目的タンパク質が完全な封入体を形成する場合, 界面活性剤では可溶化させることができず, 目的タンパク質が可溶性と不溶性の両方に存在するようなゆるい凝集体? を形成している際には, 界面活性剤での不溶性画分の可溶化ができるということでしょうか ? ご存じの方がいましたら教えていただけますと幸いです。よろしくお願いいたします。

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