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(無題) 削除/引用 No.11525-5 - 2023/06/16 (金) 10:28:16 - おお 聞きづらいというけど、基本操作とか習わないのは変な話。ラボではいままで放線菌は扱ってきたのでしょうか？ならば教員にどうするか聞きづらいならせめて操作方法を書いた本などラボにおいてないか聞いたらどうですか？あるいいま先輩がいないとしてもラボで昔から扱っているなら卒論とか修論とかあるでしょう。 洗浄するかどうかは目的にもよるでしょうし。植え継ぎなら必要ない場合もおおいと思いますが、、、

(無題) 削除/引用 No.11525-4 - 2023/06/15 (木) 20:48:06 - shii 洗浄が必要なら以下のような感じでしょうか。 5ml培養液を3000g,15min遠心、上清除去、沈殿菌体に純水を同量〜4倍量ぐらい加えて 攪拌後再度遠心して上清除去。 沈殿菌体に適切な培地加えて懸濁。同じ濁度にするためには5ml加えたほうが良いかも。 本培養する場合は、この懸濁液を本培養液用の液体培地へ1/10〜1/50量加えてほんばいようかいし。 洗浄後、再懸濁した菌体液を他の試験に用いても良いと思います。 上記は、大腸菌、酵母で私が実際やってる手順です。

(無題) 削除/引用 No.11525-3 - 2023/06/15 (木) 18:55:42 - P ＞Skeptics様 返信ありがとうございます。 放線菌を扱っています。 目的としては、洗浄し懸濁したものを原液として実験を行おうと考えていたからです。 一般的には、前培養したものをそのまま、本培養に一部摂取する流れなのでしょうか。 先輩はいなく、教員には聞きずらいです.... そのため、一人で実験している感じなので、ご教授してほしいです。 よろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.11525-2 - 2023/06/15 (木) 18:23:51 - Skeptics 大腸菌の話でしょうか？目的は？ もしプラスミドを増やすことが目的なら、そもそも菌体を洗うという操作は一般的ではありません。 指導教員か先輩に聞くことはできないんですか？

菌体洗浄方法 削除/引用 No.11525-1 - 2023/06/15 (木) 17:48:52 - P いつも参考にさせて頂いてます。 初歩的な質問で申し訳ございませんが、非常に悩んでいます。 5mLの前培養をDWで洗浄し、洗浄した菌液の一部(100μL)を本培養液に摂取したいと考えています。 しかし、5mLの前培養に対して、どの程度DWを入れるべきなのか、また遠心分離の条件なども、どう設定したらよいか分からないです。 そもそも、5mLの前培養液全量に対してではなく、この中の一部で洗浄を行えばよろしいのでしょうか。 菌体や、何をその後何を行うかによって異なると思いますが、一般的なものや皆さんが行っているやり方などをご教授していただければ幸いです。

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