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免疫沈降時の洗浄液の尿素
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No.11521-TOPIC - 2023/06/15 (木) 04:10:41 - 免疫沈降初心者
現在アガローズビーズによる免疫沈降を始めたばかりなのですが、溶出前のビーズの洗浄で洗浄液にオプションで2Mの尿素を加えるというプロトコールを見たのですが、この際の尿素はどのような役割を果たすのでしょうか?
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No.11521-3 - 2023/06/16 (金) 00:09:54 - 免疫沈降初心者
おお様
ありがとうございます。一度試してみてうまくいくかどうか見てみたいと思います。
(無題)
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No.11521-2 - 2023/06/15 (木) 06:41:20 - おお
非特異的な吸着、結合をはがす役割があります。実は4M以上加えるとほとんどのタンパクが変性してしまう強い変性剤です。低い濃度ではその効果はほどほどなので場合によっては有効かもしれません。
Protein AやGと抗体の結合はそれに耐えうるのか私にはわかりません。支持体にコバレントについていればその心配はありませんが。
同じようなもので300mMぐらいのLiClを使う方法もあります。こちらのほうがマイルドですが、洗浄力は弱いかもしれません
免疫沈降時の洗浄液の尿素
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No.11521-1 - 2023/06/15 (木) 04:10:41 - 免疫沈降初心者
現在アガローズビーズによる免疫沈降を始めたばかりなのですが、溶出前のビーズの洗浄で洗浄液にオプションで2Mの尿素を加えるというプロトコールを見たのですが、この際の尿素はどのような役割を果たすのでしょうか?
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