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(無題) 削除/引用 No.11490-6 - 2023/06/04 (日) 12:56:48 - い 自前の設備も予算もわからないと答えようがない

(無題) 削除/引用 No.11490-5 - 2023/06/04 (日) 09:05:25 - おお ノックダウンならいっぺんにいけそうだけど。 先のターゲットにした遺伝子を両方ともともクリスパーで両アレルともESの状態で潰して、その上で2つをCreで調整できるようにするとか。 もしのっている染色体が全部違うなら、それぞの一つの遺伝子にloxP入れた4種類のLineを作り、マウスにしてから交配で4つ揃えるか。

(無題) 削除/引用 No.11490-4 - 2023/06/04 (日) 00:47:03 - ade cKOアリルのマウスをそれぞれ４つ作るか購入して順に交配でしょう。そのどこかでCreマウスも交配。 5系統の交配とホモ化だから、ちゃんと計算してないけれど3年くらいかかって大学院もしくはポスドク期間の大部分がマウス作製に消え、マウスの解析はほとんどできずに終わる気がする。

(無題) 削除/引用 No.11490-3 - 2023/06/03 (土) 22:05:37 - DEA ノックアウトマウスの研究は5年前ほどにいったん中止になっていて、ダブルノックアウトのストックが消失している状況です。卵子・精子も保存されていないようです。

(無題) 削除/引用 No.11490-2 - 2023/06/03 (土) 15:21:10 - おお 表現型が出ないダブルノックアウトをベースにしないの？

クアドラブルノックアウトを作製する最速の方法 削除/引用 No.11490-1 - 2023/06/03 (土) 13:00:12 - DEA 自分が所属する研究室では、ある遺伝子ファミリーの研究をしていまして、マウスと生理学を組み合わせて脳の研究をしています。 ダブルノックアウトでは全く表現型が出ないので、遺伝子の機能の重複があることが分かっている4つの遺伝子をノックアウトして表現型を見ることになったのですが、クアドラプルノックアウトを作製する最速の方法は何になるのでしょうか。耐性致死になる可能性もあるので、脳特異的なcreとこのマウスを組み合わせることを検討しているのですが、4つの遺伝子+creはどのように組み合わせて作製するのが最速でしょうか。 いずれもホモにする必要があると考えています。

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