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滑走式ミクロトームでの脳切片作成 トピック削除
No.11414-TOPIC - 2023/04/29 (土) 05:50:46 - えのき
4%PFAで固定済みのマウスの脳をゼラチンで包埋し、室温下で、滑走式ミクロトームで40 μmの切片を作成することは可能でしょうか?それとも凍結させなければいけないでしょうか。
これまでビブラトームしか使用したことがなかったのですが、今度新しいラボに移動が決まって、使用できるのが滑走式のミクロトームしかありません。ドライアイスを使用すれば凍結切片を作成できると思うのですが、もしできれば室温で40μmの脳切片を作成したいのです。
馬鹿馬鹿しい質問で申し訳ありませんが、皆様の知恵をお貸しください。
 
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(無題) 削除/引用
No.11414-2 - 2023/04/29 (土) 20:52:49 - あの
レスがつかないようなので、、、

自分がこれまでの経験で、その状況ならどうするかの想像は次です。

まず室温は無理です。刃とサンプルが低温である必要があります。

そのため、そのミクロトームを低温室に移動させて、できれば一晩置きます。

サンプルも、ミクロトームにOctコンパウンドで固定できるようにした後で、
表面はOCTコンパウンドで包埋して、
冷蔵庫の冷凍室ぐらいの温度で予備冷却しておきます。


その後で、カットです。比較的に厚めなので、サンプルの温度がちょっと上がっても
切れる可能性はあるかもしれません。

滑走式ミクロトームでの脳切片作成 削除/引用
No.11414-1 - 2023/04/29 (土) 05:50:46 - えのき
4%PFAで固定済みのマウスの脳をゼラチンで包埋し、室温下で、滑走式ミクロトームで40 μmの切片を作成することは可能でしょうか?それとも凍結させなければいけないでしょうか。
これまでビブラトームしか使用したことがなかったのですが、今度新しいラボに移動が決まって、使用できるのが滑走式のミクロトームしかありません。ドライアイスを使用すれば凍結切片を作成できると思うのですが、もしできれば室温で40μmの脳切片を作成したいのです。
馬鹿馬鹿しい質問で申し訳ありませんが、皆様の知恵をお貸しください。

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