Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

RANseqにおけるTPM値と実際のタンパク質発現について トピック削除
No.11404-TOPIC - 2023/04/26 (水) 02:23:43 - Q-dot
ある遺伝子について、RNAseq解析で得られたTPM値が高くても実際にウェスタンブロットで確認してみると全く検出できない細胞がいる一方で、TPM値は低いのにウエスタンブロットで確認してみると高い発現量が細胞もあり、TPM値ってあまりアテにならないのだな・・・と思ったのですが、TPM値が高くても実際にタンパク質としての存在量が低くなるのにはいったいどういった理由が考えられるのでしょうか?
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.11404-5 - 2023/04/26 (水) 16:37:22 - Q-dot
なるほどー、ありがとうございます。
HIF1みたいに通常条件下では翻訳されては即座に分解されるようなケースは考えられるなと思っていましたが、翻訳を調節する分子機構については素人なもので、全然知りませんでした。
そういうのもあるんですね。。。

(無題) 削除/引用
No.11404-4 - 2023/04/26 (水) 14:50:19 - 12
フェリチンみたいなもありますが、多くの場合、RNAレベルと蛋白質レベルは基本的に独立して制御されているし、かならずしも単純ではないです。ただmRNAレベルで変化してるならば、その遺伝子の転写活性化やその上流のシグナル伝達経路に何か変化がおきてることが予想されるので、むしろ逆方向でそっちの方をさかのぼって追求していくのも、ありかもしれないとおもいました。もちろんmRNAの安定性とかも調べるのもよいとはおもいますが。

(無題) 削除/引用
No.11404-3 - 2023/04/26 (水) 02:50:18 - おお
ものによってはPre-mRNAの状態で核にすでに蓄えらて発現に備えているものが、刺激により巣プライシングが起こり、Cytosolに移行してたんぱくを発現するようになるという遺伝子もある。

あと抗体については発現していてもエピトープ部位に変化があれば検出感度が変わる。

(無題) 削除/引用
No.11404-2 - 2023/04/26 (水) 02:46:46 - おお
mRNAは発現しているが、翻訳が阻害されている。
タンパクが発現しているが、半減期を調製してたんぱく量を制御している。
Oocytesとか典型的で将来TranslationされるべくmRNAをいろいろ蓄えているというのはPost transcriptional な制御の理解の土台となっているはず。

もっと最近の話ではmiRNAsは翻訳阻害をするのだから、mRNAがあってもそれに対するmiRNAsの発現および活性が強かったらたんぱくは少ないはず。

RANseqにおけるTPM値と実際のタンパク質発現について 削除/引用
No.11404-1 - 2023/04/26 (水) 02:23:43 - Q-dot
ある遺伝子について、RNAseq解析で得られたTPM値が高くても実際にウェスタンブロットで確認してみると全く検出できない細胞がいる一方で、TPM値は低いのにウエスタンブロットで確認してみると高い発現量が細胞もあり、TPM値ってあまりアテにならないのだな・・・と思ったのですが、TPM値が高くても実際にタンパク質としての存在量が低くなるのにはいったいどういった理由が考えられるのでしょうか?

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。