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(無題) 削除/引用 No.11403-3 - 2023/04/26 (水) 02:34:05 - おお 難溶性のものがどういう振る舞いをするかちょっと未知数ですが、封入体のようなものであればおそらく１万ｇ以下で遠沈できると思いますので、その上清を膜+可溶性画分とするか、あるいは上清を１０万ｇ（もしかしたら５万ｇ弱でも可能）で断片化した膜を回収するか。 単なる遠心で難しいなら、パーコールかショ糖密度勾配かなとおもう。ヒト細胞でミトコンドリアを回収したときのかすかな記憶で書こうとしたけど、意外とそう単純でもなさそうなので、自身で大腸菌の場合はどうか確認してみてください。 ちょっとぐぐったところ、 https://reader.elsevier.com/reader/sd/pii/S0003269784710062?token=6F4FF18511308767E0ADEEB0E0941432F45F5A9AD5AEDCF6B3ED9192FCD1FBE5686262358023218698FF9B86951E2FD3&originRegion=us-east-1&originCreation=20230425171118 OuterとInnerを別々に分けているみたいだけど、パーコールの濃度を調整すれば（ステップワイズに違う濃度のものを重層するなど）、膜とそのほかのフラクションに分けれると思う。１６．５％の上に５％ぐらいを重層してその上に難溶部分を回収した残りの溶液を重層すれば１６．５％のところに回収できるんじゃないかなと勝手に想像している。

(無題) 削除/引用 No.11403-2 - 2023/04/25 (火) 22:43:03 - G25 難溶性タンパク質とは封入体からのこただと思うけど、このトピはフォローしてるかな http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;Code=11391

大腸菌の膜タンパク質画分 削除/引用 No.11403-1 - 2023/04/25 (火) 22:22:23 - mm 大腸菌の超音波破砕を行なった後、沈殿画分には難溶性タンパク質画分および膜タンパク質画分が含まれていると思いますが、ここから、両者を分画する方法は何かありますでしょうか。企業から市販されているキットやバッファーを使用しない方法がありましたら、教えていただきたいです。

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