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(無題) 削除/引用 No.11390-2 - 2023/04/21 (金) 22:30:12 - たこ助 TrueGel３Dを使ったことはないですが、単純にボイデンチャンバー、transwellではダメですか？ chemoattractantとしての活性を評価するくらいならそれでいいと勝手にと思ってます。 接着云々になるならtrue gel coatしてtranswellでもやればいいように思います。 TrueGel３Dっていうのでmigration/invasion assayをしている論文はないですか？ あるなら同条件(細胞等もあわせて)でやってみてはどうでしょう。 ないのであれば手探りになるような気がしますが。 どの程度の分子量までがそのゲル内に入り込めるのか分かりませんが、gelではなく培地中に入れてみてかわりませんか？ ああ、でもECMだと厳しいかな・・・lamininとかだとまず無理だしなぁ。 その他の機能性タンパク質というところが気になりますね。 RGDをゲルに混ぜて作るそうですが、細胞接着自体はしてるのかしら？ 接着できいない状態だとagarの時のようにただ浮いてるようなイメージしかないですが、まあそこは置いときますか。

Matrigel等用いない3D細胞浸潤/移動アッセイ法について 削除/引用 No.11390-1 - 2023/04/21 (金) 10:28:29 - 両津勘吉 はじめまして。両津勘吉と申します。 現在、細胞の浸潤/移動のメカニズム解析を行っております。 Corning社のMatrigelやSigma社のMaxgelを用い、細胞塊をゲルでドーム状に包埋して培養し、細胞の浸潤/移動アッセイを行っています。 最近、Matrigel/Maxgel中に含まれている因子の浸潤/移動への機能を解析するプロジェクトを開始し、これら因子が存在しない条件（すなわちMatrigel/Maxgelを用いない）で、上記と同様の浸潤/移動アッセイを行おうと考え、Merck社のTrueGel3Dに着目をしています。 TrueGel３Dはデキストランを細胞分解可能なクロスリンカーでゲル化するシステムで、インテグリン結合分子であるRGDやその他の機能性タンパク質を混ぜてゲル化することができるらしいです。 これを購入して、浸潤/移動を促す細胞外マトリックスタンパク質を混ぜて培養してみたのですが、全く細胞の浸潤/移動が観察されません。 ゲルの硬さやマトリックスタンパク質濃度をいろいろとふってみたのですが、いずれもだめでした。 質問として、 1) TrueGel3Dシステムを使ったことのある方等いらっしゃいますか？トラブル解消のアドバイス等がいただけると嬉しいです。 2) TrueGel3D以外において、細胞の浸潤/移動に用いることができそうなシステムをご存知の方いらっしゃいませんか？ ご教授のほど、何卒よろしくお願いいたします。

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