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(無題) 削除/引用 No.11348-9 - 2023/04/09 (日) 11:30:43 - あの ありがとうございます。 参考にします。

(無題) 削除/引用 No.11348-8 - 2023/04/09 (日) 11:26:10 - toto ええ、市販品を使っていた頃は、AとＢを混ぜて、水で2倍に希釈して使ってました。

(無題) 削除/引用 No.11348-7 - 2023/04/09 (日) 10:40:21 - あの あるいは、市販品って、A液とB液を混ぜてから水だけで希釈すれば 実は使うことができたりしますか？たとえば2倍希釈とか。

(無題) 削除/引用 No.11348-6 - 2023/04/09 (日) 10:37:21 - あの Toto様 早速の御回答をありがとうございます。 市販品を希釈するのがA液だけだと、 B液だけ早く無くなることになりそうです。 市販品は、水で希釈するだけではダメでしょうか？ それとも記載されたレシピのB液を作って、割る方が良いでしょうか？ もし御経験か御意見あれば、よろしくお願いします。

(無題) 削除/引用 No.11348-5 - 2023/04/09 (日) 08:58:24 - toto A液の希釈は水で大丈夫です。Trisの濃度はあまり関係ないようですが、一応、A液の成分の比率は変えてません。市販品のでも水で薄めています。 また、入れ物ですが、ご指摘の通り市販品と同じで、A液にはL012が入ってるので、遮光ボトルに入れてます。ただ、それほど気を使うほどでもないようです。

(無題) 削除/引用 No.11348-4 - 2023/04/08 (土) 23:13:36 - あの それから、市販品の場合は、A液が褐色ボトルで、B液が白色ボトルです(と記憶)。 自作の場合も、A液は遮光が必須でしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11348-3 - 2023/04/08 (土) 23:10:12 - あの toto様 早速の貴重な情報をありがとうございます。 一点、次の詳細を確認させてください: 　これで高感度すぎるときはAを希釈 これは25mM Tris HCl (pH7.1) だけで希釈すれば良いことでしょうか？ つまりA液の他の三成分の比率は変えてはいけないということでしょうか？ それから、もし市販品のECLを薄めて使おうとすれば、TrisHCl液とB液を1対1で混合した液で 希釈すれば良いでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11348-2 - 2023/04/08 (土) 22:42:40 - toto 自家製のほうが安く、感度も市販の高感度キットと同程度にも低めにもできます。L-012はFujifilmから、SPTZ(Sodium 3-(phenothiazin-10-yl)propane-1-sulfonate) はコスモバイオから買えます。以下の組成の溶液を作ります。 A: 0.075 mM L-012(1.1mg/50mL)/1.5 mM SPTZ(12.5mg/50mL)/25mM imidazole/25 mM TrisCl pH7.1 B: 4 mM sodium perborate あとはAとBを混ぜて発光です。これらは冷蔵庫で保存すれば安定で、いつまでも使えてます。これで高感度すぎるときはAを希釈します。 費用はSPTZが律速で500mgのを買えば、他は最小単位で全部で6〜7万くらいしますが、A液は２L作れるので、近隣ラボと一緒に買いました。 ネットでこれを見つけて以来、市販のキットは買ったことがありません。

ECL Prime 削除/引用 No.11348-1 - 2023/04/08 (土) 11:51:30 - あの 詳しい方、よろしくお願いします。 CytivaのECL Primeをウエスタンブロットで使っています。 コストを下げるために、 　何か良い方法、 あるいは 　他社の相当品のおすすめ があれば教えてください。 ECL Primeと同等の感度や、発光持続時間は必須です。

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