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心臓の組織サンプル トピック削除
No.11280-TOPIC - 2023/03/20 (月) 11:49:36 - コロ
灌流固定する際、左心室から固定液を灌流するのが一般的と思います。
当然心臓に傷が入るわけですが、心臓を無傷で固定しつつ全身を固定する方法は無いのでしょうか?
大量に準備できないマウスのため、1匹から可能な限り多くのサンプルを回収したいのですが、心臓を無傷で確保しつつ全身を灌流固定する方法が思い浮かびません。
何卒皆様のご意見を頂戴できないでしょうか?
よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.11280-8 - 2023/03/27 (月) 17:04:47 - 1
あたりまえですが還流するにはどこかに出口もつくる必要があります。たとえば刺入部を針と血管をまとめて結紮したら、その位置よりも下方の下大静脈を切るとか。

(無題) 削除/引用
No.11280-7 - 2023/03/27 (月) 12:18:10 - 24
私のところは灌流固定無しで摘出して4%PFAに24時間つけてますね。
染める抗体によって違うでしょうが、今はこれで問題になったことはないです。

(無題) 削除/引用
No.11280-6 - 2023/03/27 (月) 11:14:01 - AA
心臓は中空で厚み自体は薄いので一晩つければ十分だと思います。
なお、房室内に空気が入っていると液面に浮いてきちゃうのでうまく沈めてください

(無題) 削除/引用
No.11280-5 - 2023/03/26 (日) 20:12:59 - コロ
皆様ご意見いただきありがとうございます!
まずは下大静脈からアプローチしてみることにしました。

それを踏まえ、灌流後の固定についても質問させてください。
採取後のPFAに漬ける時間は組織によりバラバラかと思います。
今のところは採取後24時間漬ける予定なのですが、皆さんはどれくらいの時間PFAに漬けていますか?
ご意見いただけると嬉しいです。
よろしくお願い致します。

(無題) 削除/引用
No.11280-4 - 2023/03/21 (火) 11:08:36 - ふみ
腹部大動脈から灌流する手があるかと思います。
大出血で周囲を汚すおそれがあるのと、難しいのとで、採用しづらいかもしれませんが。

訂正 削除/引用
No.11280-3 - 2023/03/21 (火) 03:00:18 - 1
訂正:腹部大静脈(誤)→下大静脈(正)

この血管はマウスの全採血の時にも使うことがあります。

(無題) 削除/引用
No.11280-2 - 2023/03/20 (月) 18:53:27 - 1
開腹して腸を全部外に出してから、露出した腹部大静脈に縫合糸をかけてから慎重に針を水平に近い角度で挿入して、次いで縫合糸で針ごと血管を結紮してからペリスタポンプで送液するとか。慣れるまでは簡単でないのでそれなりの数、練習は必要と思いますが。

心臓の組織サンプル 削除/引用
No.11280-1 - 2023/03/20 (月) 11:49:36 - コロ
灌流固定する際、左心室から固定液を灌流するのが一般的と思います。
当然心臓に傷が入るわけですが、心臓を無傷で固定しつつ全身を固定する方法は無いのでしょうか?
大量に準備できないマウスのため、1匹から可能な限り多くのサンプルを回収したいのですが、心臓を無傷で確保しつつ全身を灌流固定する方法が思い浮かびません。
何卒皆様のご意見を頂戴できないでしょうか?
よろしくお願い致します。

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