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Rajiの培養方法 トピック削除
No.11267-TOPIC - 2023/03/13 (月) 06:30:39 - checkit
Rajiを培養しているのですが、自分の培養方法が悪いのか、DAPIで染めると分葉核?や核が飛び散ったような形態(apoptosis?)が大量に見られます。分裂像とは異なります。

普通にRPMI1640 10%FBSで培養しています。

3日ほど置くとDishに吸着する成分もありそうで、もしかしたら、はがすと細胞が死んでいるのかもしれません。
また浮遊していても、cell aggregateを形成している成分も多いのですが、培養方法が悪いのでしょうか。
βメルカプトエタノールを加える方もいらっしゃるようです。
 
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No.11267-6 - 2023/03/15 (水) 14:17:52 - おお
使っている血清のロットとの相性が悪いとか、、、

(無題) 削除/引用
No.11267-5 - 2023/03/15 (水) 11:03:23 - ema
販売元に画像を聞いてみるのは良いと思います。
販売しているJCRBに 
https://cellbank.nibiohn.go.jp/~cellbank/cgi-bin/search_res_det.cgi?ID=553
近い画像がありますし
Wikiの 不規則にでこぼこした核と、フリーの凝集したリボソームがある広い細胞質を有する ともありますので。
ネット上のRaji写真それなりにcell aggregateらしき画像もあります。

(無題) 削除/引用
No.11267-4 - 2023/03/13 (月) 07:25:44 - おお
まあ、培地や血清にいつの間にやら入っていたという事もありえますから、マイコプラズマが入ると変な核(かどうかよくわからない)とか目立ってきますから。

(無題) 削除/引用
No.11267-3 - 2023/03/13 (月) 07:03:57 - checkit
市販品をダイレクトに使用しましたが、、、チェックする必要ありますでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.11267-2 - 2023/03/13 (月) 06:57:36 - おお
マイコプラズマのコンタミの可能性は排除できますか?

Rajiの培養方法 削除/引用
No.11267-1 - 2023/03/13 (月) 06:30:39 - checkit
Rajiを培養しているのですが、自分の培養方法が悪いのか、DAPIで染めると分葉核?や核が飛び散ったような形態(apoptosis?)が大量に見られます。分裂像とは異なります。

普通にRPMI1640 10%FBSで培養しています。

3日ほど置くとDishに吸着する成分もありそうで、もしかしたら、はがすと細胞が死んでいるのかもしれません。
また浮遊していても、cell aggregateを形成している成分も多いのですが、培養方法が悪いのでしょうか。
βメルカプトエタノールを加える方もいらっしゃるようです。

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