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(無題) 削除/引用 No.11244-5 - 2023/03/06 (月) 08:17:07 - Sasazou 御助言ありがとうございます。 ALPの酵素活性を一度確認してみます。

(無題) 削除/引用 No.11244-4 - 2023/03/05 (日) 14:51:53 - おお 示された状況から察するに、実験的に何らかの条件を付加した石灰化の影響などを見ているのだから、その条件による物だろうと思いますが、それを何で？と聞かれてもどう答えたらいいやら。 ALPは石灰化のコアになるヒドロキシアパタイトのリン酸を供給する物だと思います。これが発現していても機能しないのではその先にすすみません。カルシウムが適所に供給されているか、リン酸のソースがALPと接触できているか、ALP自身の活性はあるのか。そんなところが考えるべきところかなと専門外ながらに思います。

(無題) 削除/引用 No.11244-3 - 2023/03/05 (日) 08:17:55 - Sasazou 間接的に結果を伺っているだけですので詳しいプロトコルは分かりませんが、 通常通りと聞いておりますので、PBS(-)洗浄後に2%PFA固定し、MQ洗浄と染色、MQ洗浄で染色されているかと思います。 同時に試験をしておりますコントロール群では染色されており、試験群のみでアリザリンレッド陰性の結果となっております。試験群では培地中のNaやSiなどのイオン濃度が高い状態なのですが、これらが影響する可能性などはありますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11244-2 - 2023/03/04 (土) 17:25:00 - あふ 染色のプロトコルはどんな感じですか？

アリザリンレッド染色 削除/引用 No.11244-1 - 2023/03/04 (土) 12:53:01 - Sasazou 骨芽細胞を用いて石灰化の評価を行なっております。 細胞の増殖活性は高く、ALPも染色されますが、アリザリンレッド染色がうまく染まりません。 ALP陽性で石灰化が抑制される原因としてはどのような可能性が考えられるのでしょうか？

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