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(無題) 削除/引用 No.11239-6 - 2023/03/02 (木) 08:51:12 - \\ 私も3 fragmentまでは2 : 0.5でやっています。0.8 : 0.2だとコロニー数が激減したことがありやめました。 > さらに節約したいなら 過去トピでFastCloningというのが紹介されていましたね。 http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;Code=7212

(無題) 削除/引用 No.11239-5 - 2023/03/01 (水) 21:13:24 - 自作できますよ 2ul DNA + 0.5ulでやってますが、さらに節約したいならSLiCE作って自作したほうが良いです。

(無題) 削除/引用 No.11239-4 - 2023/02/28 (火) 19:34:50 - 774R 2ul DNA + 0.5ul Infusionでやってます。 トランスフォームでコンピ溶液に加える量としてはこれ以上あってもしょうがないですので。

(無題) 削除/引用 No.11239-3 - 2023/02/28 (火) 16:42:12 - ぽー 配列に依存する部分もあると思いますが、DNA:infusion=2:0.5 ulでも、断片が2個くらいまでならできました。 反応時間を30分に伸ばしたほうが効率がいい傾向にあります。 ただし、DNA量が減るのでコロニー数は少なくなります。

(無題) 削除/引用 No.11239-2 - 2023/02/28 (火) 15:51:00 - AA DNA:In-fusion=4:1 ulで日常的に実施しています。 2:0.5 ulはやったことはないですがDNA側に問題がなければ出来るんじゃないかと思います。 DNA液の量的にplasmid側の体積が小さくなるのでピペッティング精度的にちょっと避けたいかなと個人的には思います。

In fusion　どこまでスケールダウンできますか？ 削除/引用 No.11239-1 - 2023/02/28 (火) 15:30:39 - akibooooo Clontech TakaraのIn fusionキットをお使いの方に質問があります。 私は、400個以上の遺伝子のクリーニングをIn fusionキットを使って行う予定にしております。 現在キャンペーンをやっていて 50回￥90,400 250回￥304,000 となっています。 マニュアルを見ると、5X In-Fusion HD Enzyme Premix を2µl使って実験すると書かれています。 これを0.5µlで上手くいきませんかね？(1/4スケールダウン） 1µlではさすがにうまく行きますよね？（1/2スケールダウン） もっとケチってもできますか？ 教えていただけませんでしょうか？ よろしくお願いいたします。

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