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MEFの不死化 トピック削除
No.1121-TOPIC - 2012/11/08 (木) 04:03:34 - びぜん
ある遺伝子をノックダウンしたマウスのMEFを採取し、不死化を試みています。SV40 large T antigenを遺伝子導入して、ネオマイシンでselectしています。

そこで基本的な質問なのですが、

１．MEFの不死化は、どのタイミングで不死化したと評価していますか？

２．SV40 large T antigenを遺伝子導入をする場合としない場合とで、不死化効率はどの程度の違いがあるのでしょうか？

３．ネオマイシンでselectは必要でしょうか。

ご教示いただければ幸いです。
　
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(無題) 削除/引用
No.1121-6 - 2012/11/19 (月) 23:12:27 - あかね
びぜん様
後学のため、どのようにして解決になったのか状況を記載して頂けるとありがたいです。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.1121-5 - 2012/11/19 (月) 16:27:27 - びぜん
解決しました。

(無題) 削除/引用
No.1121-4 - 2012/11/09 (金) 06:27:24 - おお
http://en.wikipedia.org/wiki/3T3_cells
三日おきにけいだいしていたら不死化したという有名なセルラインを思い出しました。

(無題) 削除/引用
No.1121-3 - 2012/11/08 (木) 22:04:23 - Harmonia
>３．ネオマイシンでselectは必要でしょうか。

ご質問の意図を理解できません。
なぜこの質問が生まれたのか、説明してください。

(無題) 削除/引用
No.1121-2 - 2012/11/08 (木) 08:49:44 - おお
You might want to take a look at this.
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/0471142727.mb2801s70/full

MEFの不死化 削除/引用
No.1121-1 - 2012/11/08 (木) 04:03:34 - びぜん
ある遺伝子をノックダウンしたマウスのMEFを採取し、不死化を試みています。SV40 large T antigenを遺伝子導入して、ネオマイシンでselectしています。

そこで基本的な質問なのですが、

１．MEFの不死化は、どのタイミングで不死化したと評価していますか？

２．SV40 large T antigenを遺伝子導入をする場合としない場合とで、不死化効率はどの程度の違いがあるのでしょうか？

３．ネオマイシンでselectは必要でしょうか。

ご教示いただければ幸いです。
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