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(無題) 削除/引用 No.11194-3 - 2023/02/13 (月) 02:59:39 - s G25さま ご回答ありがとうございます。 特定のフィルターのみで斑点がみられたのでアグっていることが考えられました。遠心後の上清使用をしてみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.11194-2 - 2023/02/10 (金) 16:53:28 - G25 蛍光色素がアグリゲートしているかもしれません。 アグリゲートはしばしば貼り付いて洗ってもとれないことがあります。 ストック溶液を強く遠心して上清から使うとか、希釈液をディスクフィルターかなにかに通すとか。 その光る斑点はその色素にあった特定のフィルターセットでしか光りませんか？　ほかの波長でも見てみましたか？ もし波長関係なく光って見えるなら、マウント剤に入った小さな気泡か何かが励起光を散乱しているだけかもしれない。 マウント剤は室温に十分に馴らしてから（冷えてると後で温まったときに気泡が出る）。撹拌して空気を抱き込まないようにする。 マウント剤を疑うなら、一旦、マウント剤なし、PBSでもたらしてカバーグラスをかけて観察してみたら。それでも同じようなノイズが出るならマウント剤以前の問題。問題なければマウント剤でマウントしなおしてみればいい。

mitotrackerなどの蛍光染色について 削除/引用 No.11194-1 - 2023/02/10 (金) 14:29:41 - s 蛍光染色して観察しているのですが、バックに蛍光する斑点が多数みられます。 洗いはしっかりしているのですが（TBST 10分x3）変化がありません。 DAPI入りのコンパウンドなどが影響しているのでしょうか？ 対策があれば教えてもらいたいです。

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