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腹腔マクロファージの精製方法 トピック削除
No.11186-TOPIC - 2023/02/09 (木) 03:47:38 - Up
腹腔マクロファージの精製方法
 
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(無題) 削除/引用
No.11186-5 - 2023/02/09 (木) 12:41:15 - Up
slideを読ませていただきました。ありがとうございます。

基本的な質問を書かせていただきます。

腹腔マクロファージとして単離してきたものには、当然ながら、T細胞、B細胞が少数は混じっていると思いますが、CD3やCD19等で除外しなくても、F480ともう一つ別のマーカーだけを使って、マクロファージだけを単離することは十分可能だと解釈しましたが、合っておりますでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.11186-4 - 2023/02/09 (木) 12:37:42 - Up
馬鹿な質問になりますが、腹腔マクロファージとして回収されてもT細胞等混じっていますよね。F480と何かもう一つ等で分画を取ればそれで十分ということですかね。

(無題) 削除/引用
No.11186-3 - 2023/02/09 (木) 07:47:19 - あふ
(マウスの腹腔内に刺激物質を投与して遊離してきた)腹腔マクロファージを(既報に掲載されている)既知のプロトコルに沿って回収し、続いて(何らかの表面抗原マーカー陽性でマクロファージのみを引っ掛けてきて)マクロファージのみを(他の腹腔細胞から)高純度で単離したい

という認識であっていますか?

このスライドが参考になります(若干情報が古いところもありますが)
https://www.slideshare.net/Isumi7897/m1m2-73974114

腹腔内であれば、個人的にはF4/80とCD11bで引っ掛けますかね。抗体も色々あるし安いし。Iba-1単独も良いとは思いますが、まだ試してないのでわかりません。

(無題) 削除/引用
No.11186-2 - 2023/02/09 (木) 03:56:38 - Up
入力を誤りました。

腹腔マクロファージを既知のプロトコールに沿って、回収したのですが、続いてマクロファージのみを高純度で単離したいと考えています。

何も分画採取をせず、そのまま解析している人は多くいるのですが、思いの他、cell sortしている方は少ないです。

高純度で単離するための手法で、最もベーシックな方法を御存じの方はいらっしゃいますでしょうか。

腹腔マクロファージの精製方法 削除/引用
No.11186-1 - 2023/02/09 (木) 03:47:38 - Up
腹腔マクロファージの精製方法

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