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(無題) 削除/引用 No.11185-3 - 2023/02/10 (金) 03:41:03 - おお Biolegendで問題なく使えているのですね。ちょっと調べてみて目はつけてました。 ご指摘の退色はちょっと嫌かなぁとも思いますのでちょっと考えてみます。biotinは蛍光で見るという手でもあるのですがHRPやAPなどを使って定量に持ち込んでもいいかなと言うのもありまして、、、あそういえばAnti-FITC antibodyっていうのもありますね。。。ていうかそれならAnt-annexin V antibodyでもいいのか、、、 ＞自分は固定せずに生きたままプレートで顕微鏡観察したことはあります。 固定は確かに絶対的な話でもないですもんね。これはたしかに手間は省けそうです（保存して色々観察となると別ですが）。やってみてなにか気がついたことはありますでしょうか？コツというか、気を付けたこととか。個人的に洗をどの程度やるべきなのかと。FITCでしたかAlexaでしたでしょうか？ Molecular probeが単品でFITC、Alexa、Biotinなど出しているのもあとで見つけましたが、まBiolegendに比べるとちょっと高い（倍ぐらい？）かな。。。 コメントありがとうございました。助かります。

(無題) 削除/引用 No.11185-2 - 2023/02/09 (木) 13:42:12 - asan 単体で買うならば、BiolegendのAnnexin V-FITCが一番コスパはいいと思いますし、特に問題なく使えます。 https://www.biolegend.com/ja-jp/products/fitc-annexin-v-5161 APCなどを使う場合はBDとかになるかもしれませんけど。 FITC/APCの場合は顕微鏡やプレートリーダーは退色などの問題から？あまり使われないので、もしかしたらAlexa488などのほうがいいかもしれません。蛍光のいい組み合わせがなければ面倒ですがbiotinタイプをかって二次染色することも一応できます。 単体で購入してやる場合の注意点は、Annexin Vの結合は可逆的で抗体-抗原反応ではないのでCa2+イオンをバッファ中に入れる必要があります。これもAnnexin V staining buffer とかで販売してたりはしますね。 https://www.biolegend.com/ja-jp/products/annexin-v-binding-buffer-5162?GroupID=BLG2181 自分は固定せずに生きたままプレートで顕微鏡観察したことはあります。

annexin V-FITC 削除/引用 No.11185-1 - 2023/02/09 (木) 03:12:48 - おお annexin V-FITCでどの商品がおすすめでしょうか？ キットなどありますができれば単品がいいかなと思ってます。 接着細胞で、もちろん剥がしてからファックスでもいいのですが、接着した状態でWellに加えて顕微鏡で見るか、プレートリーダーで読み込むかしようと思います。たしかAbcamとかでAnnexinV反応後フォルムアルデヒド固定して観察するプロトコールがありましたがこちらについても経験がありましたらお話を伺いたいです。

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