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ELISA測定に、SDS溶液やトリトンX溶液は使用可能ですか?
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No.11135-TOPIC - 2023/01/23 (月) 21:19:16 - みすど
サンドイッチ法のELISA測定をするにあたり、
目的タンパク質を1%SDS溶液や1%トリトンX溶液で回収して、それを検体としたいのですが、
これらの回収液は原理的に測定系に影響与えますか、、、?
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No.11135-3 - 2023/01/24 (火) 11:19:23 - 1
assayに影響ないレベルまで希釈すれば可能かもしれない。Tritonはなんとかなると思うけどSDSはかなり希釈しないと影響でるかもしれない。抗体にもよるのでケースバイケースだけど。膜タンパク質とかアミロイドタンパク質とかのような難溶性タンパク質のELISAがどのようにしてなされていたかは参考になると思う。
希釈して界面活性剤の濃度が下がると難溶性タンパク質の中には沈殿を生じるものもあるかもしれない。そうなると信頼できるデータを得るのは難しい。
(無題)
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No.11135-2 - 2023/01/23 (月) 21:35:14 - あの
影響与える可能性はあります。
抗体次第の点もあると思いますが、、、
きちんと調べるには、次の2点の検討が必要だと思います。
(1)スタンダードで、濃度がゼロのウェルや、最高濃度のウェルに希釈した危惧される
薬物を入れて、どの程度の最終濃度ならスタンダードカーブがかけるかを確認する。
(2)その最終濃、あるいはより低い濃度になるように希釈したサンプルを、2倍、4倍、8倍、、
などに希釈してみて、前述のスタンダードカーブと、パラレルな曲線を描けるか。
ELISA測定に、SDS溶液やトリトンX溶液は使用可能ですか?
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No.11135-1 - 2023/01/23 (月) 21:19:16 - みすど
サンドイッチ法のELISA測定をするにあたり、
目的タンパク質を1%SDS溶液や1%トリトンX溶液で回収して、それを検体としたいのですが、
これらの回収液は原理的に測定系に影響与えますか、、、?
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