Bio Technical フォーラム

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Jurkatに有効なトランスフェクション試薬 トピック削除
No.11134-TOPIC - 2023/01/23 (月) 15:02:09 - Jurkat
をご存じないでしょうか。
プラスミドのトランスフェクションをJurkatに対して行っていますが、Lipofectamine2000, TransIT-Jurkatを用いたのですが、ほとんど発現しませんでした。
エレクトロポレーションではかなり発現するので、プラスミドの問題では無いです。
プラスミドの量が少なくて済むトランスフェクション試薬で上手く行けばと考えています。
成功した方がおられましたら情報をシェアしていただけますと幸いです。
どうぞよろしくお願いいたします。
 
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No.11134-6 - 2023/01/25 (水) 12:54:38 - toto
レンチを用いないのであれば、どちらかというと、試薬の種類よりも細胞の”いき”によるような感じがします。tfの30分間に培地を交換するとか。

(無題) 削除/引用
No.11134-5 - 2023/01/25 (水) 12:36:34 - ああ
それほど効率は良くないですが、ThermoのDMRIE-Cなどいかがでしょうか。
定性試験やWB程度ならなんとかなった気がする。

(無題) 削除/引用
No.11134-4 - 2023/01/24 (火) 09:41:18 - Jurkat
お二方、有難うございます。
なかなか難しそうですね。

(無題) 削除/引用
No.11134-3 - 2023/01/23 (月) 22:24:00 - PPP
私はレンチウイルス一択ですかね。Transfection reagentに限定だと、うまくいった試薬はないですね。。。

(無題) 削除/引用
No.11134-2 - 2023/01/23 (月) 21:25:57 - mp
20年近く前、bioradのTransFectinが極めて高効率で良く使っていました。ただ最近久しぶりに使ってみたのですが、組成が変わったのかlot差なのかさっぱりでした。というわけでうまくいくかはわかりませんが、もしラボにあるようだったら試してみてもいいかもしれません。

Jurkatに有効なトランスフェクション試薬 削除/引用
No.11134-1 - 2023/01/23 (月) 15:02:09 - Jurkat
をご存じないでしょうか。
プラスミドのトランスフェクションをJurkatに対して行っていますが、Lipofectamine2000, TransIT-Jurkatを用いたのですが、ほとんど発現しませんでした。
エレクトロポレーションではかなり発現するので、プラスミドの問題では無いです。
プラスミドの量が少なくて済むトランスフェクション試薬で上手く行けばと考えています。
成功した方がおられましたら情報をシェアしていただけますと幸いです。
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