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(無題) 削除/引用 No.11130-4 - 2023/01/23 (月) 04:06:52 - s みなさま ご回答ありがとうございます。 参考にさせていただきます。

(無題) 削除/引用 No.11130-3 - 2023/01/20 (金) 19:10:52 - おお 薬剤処理の濃度、時間などをふって、検出できる所でやれば良いかも。ただしすべてのデーターはなんらかの形で示しておいた方がいい。mRNA精製とかRTをスペしフィクプライマーにするとかで検出感度が上げられるかも知れないが、そこまでやることなのかとも思うが数値が出る可能性はある。 あるいは相対的な量にして、n=3なら一つ一つの数値をバーグラフに示し、検出限界以下のものは0とした上で、NDと明記する(ctの数値の表でもいいかも)。こう言うデーターによる統計処理は従来の統計的検定の趣旨から外れていて、再現性をいかに表現するかと言う道具として使われているとも言えるので、3つとも検出限界付近で明らかに発現が(ほぼ)なくなったと言えるなら検定とかやるまでもないと言えると思う(そうれでもやれと言う人はいるかも知れないが)。 コントロールのCt値プラスアルファのサイクル数で電気泳動してそのイメージを示す。それだけで良いと思うが、薬剤処理のレーンはコントロールのバンドの位置のデンシドで数値を出すことができるので数値に基づく統計処理はできる。

(無題) 削除/引用 No.11130-2 - 2023/01/20 (金) 18:01:49 - seventh 可能ならinputRNA量を増やして安定して増幅されるレンジに合わせる。 無処理の希釈系列を作ってどの程度の濃度まで相関しているか検量線で確認して、その下限以下であると示す。 定量可能レンジ外っぽいので数値が出たとしても信用できません。

qPCRについて 削除/引用 No.11130-1 - 2023/01/20 (金) 13:09:38 - s 薬剤処理して、発現がほぼなくなって、qPCRでdetectされないレーンがでたときの処理と計算はどうしていますか？ （ex１. target gene CT値:36,undetectable, 37の場合は　2つを採用して37.5にする。）

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