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(無題) 削除/引用 No.11065-6 - 2022/12/25 (日) 23:22:40 - う 昔、細胞質の局在することで知られるタンパク質で、GFPつけたリコンビナントを発現させたら核に集まってたというのは、身近であった。論文で出てるのはたぶん、GFPつけても影響が少なかったケースだと思うので、GFPつけたら変になって、結局、日の目を見なかったケースは結構あると思う。

(無題) 削除/引用 No.11065-5 - 2022/12/25 (日) 17:30:28 - おお >[Re:4] ポスドクさんは書きました : > 機能していることもしていないこともあります。 > いずれにしても機能していることが証明されない限り論文には使えません。 それは目的次第ですよ。

(無題) 削除/引用 No.11065-4 - 2022/12/25 (日) 17:27:51 - ポスドク 機能していることもしていないこともあります。 GFP 融合タンパク質を作られたなら、それがきちんと機能していることをまず証明しないと行けないです。機能欠失型変異体にその融合タンパク質を強制発現して機能をレスキューできるか、とか、強制発現することで細胞や動物に悪さをしないか（生存率や機能が下がらないか）などです。 人からもらった融合タンパク質なら、そういう実験をしてあるかどうかを論文でチェックすれば良いです。してないなら信用できないので自分でやらないといけないです。 いずれにしても機能していることが証明されない限り論文には使えません。

(無題) 削除/引用 No.11065-3 - 2022/12/23 (金) 14:25:21 - おお > する事もあればしない事もあります。 機能する事もあればしない事もあります。 どちらがいいかと言う一般論はあまりないと思います。

(無題) 削除/引用 No.11065-2 - 2022/12/23 (金) 14:23:30 - おお する事もあればしない事もあります。どこにつけるといいかはやってみないと分からないけど、膜タンパクはC末(N末はシグナルペプチドなどが気になるので)。そう言う風にしていつ都合c末につける環境がより整っているのでそっちにつけがち。 ただし、誰も解析してないタンパクと言うわけではない事がほとんどなので論文を検索して、どっちにつけたのがワークしているのかなど調べる事が大抵。

ＧＦＰ融合タンパク質って機能していますか？ 削除/引用 No.11065-1 - 2022/12/23 (金) 13:26:10 - EEE 一般論になるのですが、GFP融合タンパク質の機能ってどれくらい本来のタンパク質と同じなのでしょうか。 N末とC末のどちらがいいのかという議論もあるのですが、みなさんどのように決定していますか。

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