Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

AAV injectionの感染範囲やIntensityが安定しない トピック削除
No.11061-TOPIC - 2022/12/22 (木) 01:27:18 - オルみタ
タイトルの通り、AAV injectionが毎回違う結果になります。
広く感染したり、ほとんど感染が見られなかったりします。

うまくいくまで何度も打てばよいのでしょうが、これって普通のことなんでしょうか。
AAVは自作で、分注して-80度で保存しています。
分注が不均一である可能性も考えましたが(そもそもAAVは、ほっとくと沈殿したりするもんなんでしょうか)、同じLOTのものを連続して違うマウスに打った場合でも、違う感染の仕方になります。

Injectionは、ガラスキャピラリーを使ったやり方で、Cortexなど表面付近に100nLをInjectionをしています。

いくつかの論文で使われていたので、iontophoresisも検討していますが、どなたか経験のある方おられませんか。

よろしくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.11061-2 - 2022/12/22 (木) 10:18:52 - Karas
脳表面の軟膜は柔軟性があるので、脳表の浅いところに打つ場合には突き抜けることなくたわんだり、ガラスピペットの穴に詰まってふさいだりすることがあります。

解決策ですが、トリパンブルーなど色素を詰めて顕微鏡下でピペット先端を観察しながら打ち、うまく行った感覚を自分の中で積み重ねていくのがお勧めです。

AAV injectionの感染範囲やIntensityが安定しない 削除/引用
No.11061-1 - 2022/12/22 (木) 01:27:18 - オルみタ
タイトルの通り、AAV injectionが毎回違う結果になります。
広く感染したり、ほとんど感染が見られなかったりします。

うまくいくまで何度も打てばよいのでしょうが、これって普通のことなんでしょうか。
AAVは自作で、分注して-80度で保存しています。
分注が不均一である可能性も考えましたが(そもそもAAVは、ほっとくと沈殿したりするもんなんでしょうか)、同じLOTのものを連続して違うマウスに打った場合でも、違う感染の仕方になります。

Injectionは、ガラスキャピラリーを使ったやり方で、Cortexなど表面付近に100nLをInjectionをしています。

いくつかの論文で使われていたので、iontophoresisも検討していますが、どなたか経験のある方おられませんか。

よろしくお願いいたします。

2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。