流石に皆大好きPCR・・
今のKOD、特にプレミックスなら製品は冷凍で届くから
丁寧にやるなら大抵の試薬にするように
分注小分け冷凍で用時使い切りがベストだろうけど
自分はKODメインで使ってるけど
少なくとも保管温度で結果に影響する・・
失活でポジコンすら出ないなんてことはまずなくて
あったとして変異入れた時に増えない場合はあるけど
それは基本的にPCR温度時間条件を振って調整するし
新しく溶解させれば必ずしも改善する保証もないからで
基本的には1mL製品を1本ずつ冷蔵に置いておけば
形質転換明けの朝からPCR〜sequenceまで持って行けるので
手で温め溶かしたりするよりは温度的にやさしそうだからそうしてるし
1本10〜25uLレベルで使っても8連でやってれば1か月以内には使い切るから
半年冷蔵とか片づけ忘れ常温一晩放置とかしなければ
普通に使うかな
もちろんテンプレートにするような基盤となる少数サンプルや
新しいプライマーで初回PCRなら極力新品を使うし
冷蔵でしばらく経ったものはコロニーPCRにでも使えば
仮に影響があっても別コロニーから取れるし。
個人的には制限酵素のような冷凍不凍製品より
98℃付近まで上げ下げするPCR試薬はオンアイス操作すら
しないでもいいかなとは思ってるけど
どうせ精製でPrepする時はプロトコール上4℃表記はないし
最終的にsequenceで見るからそこでチェックできるし |
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