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リアルタイムPCRのノーマライゼーションについて トピック削除
No.11041-TOPIC - 2022/12/15 (木) 16:43:36 - よしこ
近年、ウエスタンブロッティングのノーマライズにCBB等による総タンパク質染色を用いた補正方法がささやかれています。

リアルタイムPCRのデータの補正にも同様にハウスキーピングを用いない補正方法があるのではないかと探しているのですが、調べ方が悪いせいか、なかなかヒットしません。

補正の正確性や、ハウスキーピング模索にかかる時間や材料費を考えると、存在していてほしいと願っているのですが、心当たりのある方はご回答のほどよろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.11041-3 - 2022/12/16 (金) 08:16:49 - よしこ
おおさん
ご返信ありがとうございます。

> 例えば、正確にRNA量を測って、一定の割合でスパイクRNAを加えるというては有りますが。

手元にあるのがcDNAであるため、逆転写後に可能な補正方法であることが望ましいのですが、やはりハウスキーピングを使うしかないのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.11041-2 - 2022/12/15 (木) 17:37:26 - おお
https://www.researchgate.net/publication/7920291_Real-time_RT-PCR_normalisation_Strategies_and_considerations

例えば、正確にRNA量を測って、一定の割合でスパイクRNAを加えるというては有りますが。

リアルタイムPCRのノーマライゼーションについて 削除/引用
No.11041-1 - 2022/12/15 (木) 16:43:36 - よしこ
近年、ウエスタンブロッティングのノーマライズにCBB等による総タンパク質染色を用いた補正方法がささやかれています。

リアルタイムPCRのデータの補正にも同様にハウスキーピングを用いない補正方法があるのではないかと探しているのですが、調べ方が悪いせいか、なかなかヒットしません。

補正の正確性や、ハウスキーピング模索にかかる時間や材料費を考えると、存在していてほしいと願っているのですが、心当たりのある方はご回答のほどよろしくお願いいたします。

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