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(無題) 削除/引用 No.11005-8 - 2022/12/07 (水) 08:25:13 - clm おお様 CO2インキュベーター内では、フラスコを保管するのみですので、蓋を緩めて保管するようにします。 774様 IWAKIのオンラインカタログありがとうございます。 現在所持しているフラスコのベントキャップには数字が書いてありました。 それがカタログでいうメーカー名と同じことなのかは問合せしております。

(無題) 削除/引用 No.11005-7 - 2022/12/02 (金) 11:33:21 - 774 IWAKIのオンラインカタログにベントキャップの正しい締め方の記載があるので参照して下さい。 下のpdfの33ページ目(ノンブルは44ページ)。 https://iwaki.atgc.co.jp/div/rika/pdf/catalog_tissue_culture_ware_2022-02.pdf 大概のメーカーで、正しく締めたとき上に来る部分に目印があります。 メーカー名だったり、矢頭だったり、"VENT"と書いてあったり。

(無題) 削除/引用 No.11005-6 - 2022/12/02 (金) 10:58:55 - おお >[Re:5] clmさんは書きました : > ＞また、Incubator内でしばらく蓋を緩めた状態にしておいて蓋を完全に締めて　 > 密封状態にしたならpHの極端な変化は防げます。 > ⇒一度そちらについても試してみたいと思います。 特殊なとき以外はしないので、蓋は緩めて培養すればいいと思います。 特殊なときととは、実験の性質上CO2 Incubatorの中で無理がある実験操作などです。 例えばHeat shockを与えたいが、４０度とかのCO2 Incubatorを用意できない（普通はそんなことはしない）ので、フラスコを外に出してHeat shockを行うとか、 フラスコで培養したまま他のラボに持っていくとか、

(無題) 削除/引用 No.11005-5 - 2022/12/02 (金) 10:50:08 - clm 774様 下記のベントキャップを使用しておりました。 https://iwaki.atgc.co.jp/div/print138/ga3259/a153/p2.html 確かにフィルターキャップの時と同じように締め切って使用していました。 これから気を付けて使用してみます。 7様 ベントキャップのものを使用しておりました。 https://iwaki.atgc.co.jp/div/print138/ga3259/a153/p2.html キャップが外れない程度で、軽く緩めて実験してみたいと思います。 おお様 仰る通りで、培地が赤紫っぽくなりました（CO2インキュベーター入れた途端にですが...）。 ＞また、Incubator内でしばらく蓋を緩めた状態にしておいて蓋を完全に締めて　 密封状態にしたならpHの極端な変化は防げます。 ⇒一度そちらについても試してみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.11005-4 - 2022/12/02 (金) 05:48:35 - おお 培地が赤紫っぽくなってないですか？フェノールレッドが入っているなら目でも確認できるでしょう。明るい赤からオレンジぐらいに保てるのはIncubator内のCO2によるものです。Incubator外で操作した状態で密閉するとCO2によるpH調整ができません。 また、Incubator内でしばらく蓋を緩めた状態にしておいて蓋を完全に締めて密封状態にしたならpHの極端な変化は防げます。

(無題) 削除/引用 No.11005-3 - 2022/12/01 (木) 19:15:08 - ７ まず今使用されているのはフィルター付きキャップのタイプということでOKでしょうか。もしフィルターのついていないただのキャップならば完全に閉めたらダメです。加減としてはキャップが外れない程度で、触ると動くくらいの感じです。軽く緩めておかないとCO2を含むガスが中に入りませんので培地の中性pHの維持ができません（５％CO2を含む外気と培地中の炭酸イオンの平衡でpHが調節されているためです）。ただ実験によっては培地にHEPESやPIPESのようなpH緩衝剤を加えてpHを調節する場合も例外的にあります。この場合は、もしCO2インキュベータで培養するならばフィルタータイプのキャップは使わず、蓋は完全に閉めて5%CO2を含む外気が入らないようにします。 フィルター付きキャップのタイプならば完全に閉めていいですが、別に無理に強く閉める必要はないです。あまり強く締めると割れるかもしれません。常識的な範囲の力で閉めてください。蓋がグラグラ動かなければいいくらいの感じです。もちろん緩めた状態でも構いません。

(無題) 削除/引用 No.11005-2 - 2022/12/01 (木) 18:53:55 - 774 フィルターキャップのフラスコは締め切ってもガス交換されますが、ベントキャップタイプは正しいベント位置に合わせないとガス交換されません。 平衡ももちろん崩れます(大概の培地は5% CO2で適正なpHとなるように作るので)。 緩すぎるとこぼれたりコンタミします。正しい位置で使いましょう。 フィルターキャップばかり使っていた人がプラ製品が品薄の時にベントタイプを初めて使ったら細胞が死に絶えるようになって、見せてもらったら締め切っていたということが2年前にありました。

Tフラスコの締めすぎるとどうなりますか？ 削除/引用 No.11005-1 - 2022/12/01 (木) 18:35:59 - clm 最近、細胞培養を始めた者です。 培養フラスコの蓋を締めすぎると良くないと聞くのですが、 何が良くないのでしょうか？ （培地中の二酸化炭素が平衡化されないとかでしょうか？） すいません、初心者的な質問で申し訳ありませんが ご回答頂けますと助かります。

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