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(無題) 削除/引用 No.10988-2 - 2022/11/26 (土) 06:28:59 - おお >[Re:1] いいださんは書きました : > Flagタグ付きのタンパク質に関して、強制発現株を作製しましたが、使用したい細胞株ではどうしても、発現レベルが低くなります。 > > 表現型解析を行いたいのですが、このまま進むべきでしょうか。あるいは、プロモーターを変えたり工夫をするべきでしょうか。 > 問題点は、発現レベルが低いと言うのが(私も良く言うけど)、あなたの検出系で弱いのであって細胞にとって十分かどうかの物差しにならない事です。 例えば、そのタンパクの発現で表れる表現系やシグナル伝達で既知のものが有れば、それをチェックして判断すればいいでしょう。 もしプラモーターを工夫するのなら、t et誘導性とかの方がある程度発現が見れそうです。一過性である程度の発現があるならば、そちらも視野に入れてもいいかもしれません。

強制発現株だが、発現レベルが低い 削除/引用 No.10988-1 - 2022/11/26 (土) 01:14:14 - いいだ Flagタグ付きのタンパク質に関して、強制発現株を作製しましたが、使用したい細胞株ではどうしても、発現レベルが低くなります。 表現型解析を行いたいのですが、このまま進むべきでしょうか。あるいは、プロモーターを変えたり工夫をするべきでしょうか。 馬鹿な質問で申し訳ないですが、大きく方針が変わる可能性がある根幹なので、少しだけご意見を聞きたいです。

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