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糖タンパク質の生体内トレーシングについて トピック削除
No.10947-TOPIC - 2022/11/10 (木) 17:05:00 - M
いつも参考にさせていただいています。

ある糖タンパク質（病原体由来）をマウスに投与した際の、生体内での分布（どの臓器に、どれくらいの時間で分布するのか）をトラッキングしたいと考えているのですが、どの方法が良いのか経験がなく悩んでおります。
蛍光標識も考えたのですが、市販のキットでは標識したいタンパク質の分子量が大きすぎて標識するのが難しいようでした。
アイソトープなどを用いて、糖タンパク質を標識してマウスに投与し、撮影してその物質の分布を確認するということは、一般的に可能なものでしょうか？
もしくは、他の方法で良い案などありましたらご教示いただけるととても嬉しいです。

全くの素人質問で申し訳ありませんが、どなたかこの分野に詳しい方のお知恵を拝借できますと幸いです。よろしくお願い致します。
　
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No.10947-6 - 2022/11/11 (金) 15:40:33 - M
おお様、 zam様、ema様

皆様、大変貴重な情報をありがとうございました！
迷走しかけていた自分にとって、教えて頂いた論文や情報はどれも役に立つものばかりでした。これらを元に少し勉強させていただいてから、実際にコラボして頂けそうな先生に打診してみようかと考えています。
お忙しい中、ご教示いただき本当にありがとうございましたm(_ _)m

(無題) 削除/引用
No.10947-5 - 2022/11/11 (金) 13:15:58 - ema
RI実験の敷居が高い施設もあるので
生体内の検出は蛍光ではなく、発光のほうが深度が正確に取れます。
詳細は色々なサイトにあるので見てください。
IVIS Imaging Systemとかは、フォーラムがある（今はコロナで無いですが）ので、実際行っている研究者に質問もしやすいと思います。

(無題) 削除/引用
No.10947-4 - 2022/11/11 (金) 09:51:46 - zam
PETも選択肢に加えてはいかがでしょうか。
一般のPET検査の核種として18Fなどが多く用いられていると思いますが、この頃は、抗体医薬のpharmacokineticsやbiodistributionを調べる際には、より半減期の長い89Zrが使われているようです。

たとえば、
10.2967/jnumed.116.177857

ご興味の糖タンパクがどれくらいの分子量かは存じませんが、抗体もそれなりの分子量があり、かつ糖鎖も持っていることから、その関連でPETをお知らせしました。

PETでマウスを扱える国内の施設は限られているでしょうから、詳しいことはそうした機関に相談されるとよいと思います。

(無題) 削除/引用
No.10947-3 - 2022/11/11 (金) 07:22:09 - おお
https://reader.elsevier.com/reader/sd/pii/S0169409X13000239?token=27C401F1E724A8E1F1D0BD89F8AC6FE8413A1F952311BCE395476ED4B59CD866E3283CC4D2FA9A446442649CBBA65112&originRegion=us-east-1&originCreation=20221110214428

薬の臨床試験の前に薬剤の投与後のDistributionを示すことが（たぶん）義務付けられていて前臨床試験の論文を探せば上記のようなデーターが見つかると思います。ラベルは私がそういうデーターを見た相当昔のものではトリチュームが主流で、合成時にトリチュームでラベルした原材料などをもちいてラベルすることが大抵だと思われます。相手がタンパクだとなにかラベルの手法を考えないといけないかもしれません。あるいはトリチウムラベルしたアミノ酸を存在下でリコンビナントを作るとか。

多分今でも前臨床ではこのような実験を要求されると思いますので、最近の文献でトリチウム以外を使っていたならそういう手法もあり得ると思います。

こういうのは薬学部を最近出た人のほうが今の状況なども含めて詳しいかもしれませんね。

(無題) 削除/引用
No.10947-2 - 2022/11/11 (金) 00:39:36 - おお
>[Re:1] Mさんは書きました :
> いつも参考にさせていただいています。

> アイソトープなどを用いて、糖タンパク質を標識してマウスに投与し、撮影してその物質の分布を確認するということは、一般的に可能なものでしょうか？

よくやられる、やられた手法です。特に薬の分布を見るのに。

糖タンパク質の生体内トレーシングについて 削除/引用
No.10947-1 - 2022/11/10 (木) 17:05:00 - M
いつも参考にさせていただいています。

ある糖タンパク質（病原体由来）をマウスに投与した際の、生体内での分布（どの臓器に、どれくらいの時間で分布するのか）をトラッキングしたいと考えているのですが、どの方法が良いのか経験がなく悩んでおります。
蛍光標識も考えたのですが、市販のキットでは標識したいタンパク質の分子量が大きすぎて標識するのが難しいようでした。
アイソトープなどを用いて、糖タンパク質を標識してマウスに投与し、撮影してその物質の分布を確認するということは、一般的に可能なものでしょうか？
もしくは、他の方法で良い案などありましたらご教示いただけるととても嬉しいです。

全くの素人質問で申し訳ありませんが、どなたかこの分野に詳しい方のお知恵を拝借できますと幸いです。よろしくお願い致します。
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