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(無題) 削除/引用 No.10944-4 - 2022/11/09 (水) 17:56:30 - おお タグ付き発現ベクターからの発現が抑えられるか確認するのはチラホラきく。mRNAレベルで落ちていれば、まあそれでもいいとは思う。 タンパクが見たいなら、IPしてIPと違う抗体でWBするとスペシフィックなバンドが観れるかも知れない。 もしたくさんバンドが出るポリクロがあるなら、ト-タルlysatesを全てのレーンに流して膜に転写して、その膜に抗体反応液(抗体がブロッキング液に入ったもの)をかけて30分ぐらい震とうして、ノンスペを吸収してから、WBに使うというと言う裏技もなくはない。

(無題) 削除/引用 No.10944-3 - 2022/11/09 (水) 15:47:51 - ９８７６ 委託で抗体作ってくれる会社は結構あるよ。抗原性予測、抗原ペプチドの設計、合成から免疫、採血、抗体価測定までのいち一連の工程を全部もしくはこちらと先方との相談で主要な部分をやってくれる。 少なくともポリクロについては昔よりも安価になってきてるし、さらにキャンペーンとか利用するとかなり安い。市販品の少ない希少な抗体なら、今だけでなく将来的にも共同研究とかいろいろ役に立つ機会があると思う。。有用性モノクロはそれなりにかかるけど。

(無題) 削除/引用 No.10944-2 - 2022/11/09 (水) 14:56:52 - み mRNA発現低下 外来性タグ付き蛋白のウェスタン

siRNAの評価で適切な抗体がない場合の対処 削除/引用 No.10944-1 - 2022/11/09 (水) 12:51:37 - eee siRNAを使って、阻害実験を行っています。 定石として、タンパク質のバンドをWBで評価しようと思ったのですが、マイナーなたんぱく質でいくつか試しましたが、適切な抗体が見つかりません。 何か対処方法はありますでしょうか？

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