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(無題) 削除/引用 No.10911-5 - 2022/11/01 (火) 02:25:17 - おお >[Re:4] G25さんは書きました : > > JMで始まる株はlacの遺伝子領域がゴッソリ抜けている様です > > ゲノムから抜けてるけどF因子に乗っています。lacZはC末側断片(lacZω)だけになってますけど。プラスミドベクターのほうにN末側断片(lacZα)を乗せてα相補性を利用するのが青白選択ですね。 JM109とかよくクローニングで（かつて）使われていたものはそうなんですが、JM１０６、１０８などはF'でLacIqを補ってないので、LacIqを導入しているものと、ゲノムの遺伝子の状態を分けて書いたつもりです。誤解があればすいません。

(無題) 削除/引用 No.10911-4 - 2022/10/31 (月) 18:05:38 - G25 > JMで始まる株はlacの遺伝子領域がゴッソリ抜けている様です ゲノムから抜けてるけどF因子に乗っています。lacZはC末側断片(lacZω)だけになってますけど。プラスミドベクターのほうにN末側断片(lacZα)を乗せてα相補性を利用するのが青白選択ですね。

(無題) 削除/引用 No.10911-3 - 2022/10/31 (月) 16:54:22 - おお 大腸菌の遺伝子ですから、改良されてない限り存在します。それとは別に、過剰発現するlac lqを組み込んだ菌株もありますね。 JMで始まる株はlacの遺伝子領域がゴッソリ抜けている様です。 https://openwetware.org/wiki/E._coli_genotypes

(無題) 削除/引用 No.10911-2 - 2022/10/31 (月) 10:37:01 - G25 野生型のlacIは欠損株であることが明示されていないならすべての株が持っているはず。 重要なのは高発現するlacI^qアリルで、IPTGでlacプロモーターをコントロールするときにはこれをもつ細菌を使う。lacIリプレッサーを高発現するので、非誘導時のleakを抑えることができるため。BL21は野生型lacIなので、タンパク質発現に使うときにはlacI^qが乗った発現ベクターを使う。 DH5αも野生型lacIなので、JM109などlacI^q系統と違って、IPTGを入れなくてもlacZが発現する。

lacI 遺伝子について 削除/引用 No.10911-1 - 2022/10/31 (月) 00:35:40 - たぬき タンパク質発現によく用いられる、lacIですが、これはBL21 DE3以外の大腸菌も持っているのですか？

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