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(無題) 削除/引用 No.10905-7 - 2022/11/01 (火) 17:39:18 - さがみ ご回答いただいた皆様 　ご回答頂きましてありがとうございました。 　お返事が遅れてしまい恐れ入ります。 　様々なご意見を頂き、解決策が見えました。 　たろう様はフリーザーから10回取り出してやっておられ、おお様や1様のドライアイスや液体窒素を使うアイディアもあり、参考になりました。 　今後はたろう様の仰いますように責任者とも相談の上、実験を進めていこうと思います。 　(既に責任者とは少し話しましたが、フリーザーの開閉は「気にしていない」との事でした) 　この度は誠にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.10905-6 - 2022/10/30 (日) 01:14:21 - 　１ 歩いたりフリーザーなんども開けるのが嫌ならチューブをスポンジ状のチューブ立てにさして、液体窒素に浮かせて実験台においといたらだめですか。（解剖して組織をチューブに入れてフリーザーにいれる時点でその様にして保存しておけば、あとでスムーズです） あとはRNAaseが失活するところまで（トリゾール中でホモジナイズまで）は一気にやってしまうということで。

(無題) 削除/引用 No.10905-4 - 2022/10/29 (土) 00:00:36 - おお ドライアイスを用意して、１０サンプル取り出しドライアイス上において、自身のペースでさばいていけばいいです。

(無題) 削除/引用 No.10905-3 - 2022/10/28 (金) 23:00:04 - たろう というか、その研究の責任者にきちんと相談してください。

(無題) 削除/引用 No.10905-2 - 2022/10/28 (金) 22:58:45 - たろう 「フリーザーから組織を取り出す → 素早く約100 mgを量り、チューブに入れる → TRIZOLでホモジナイズ」 ｘ 10回 でやっています。(解剖の際に肝臓を適度な大きさに切り分けて、その切り分けた組織片の重量を記録しています。こうしておくと、TRIZol必要量は試料ごとに予め分かっているのでTRIZolを分注しておけます。) フリーザーの頻回の開閉が問題なら、液体窒素に組織を浮かべておけばどうですか。

組織からのRNA抽出、数をさばく時 削除/引用 No.10905-1 - 2022/10/28 (金) 22:17:44 - さがみ RT-PCRのため、ラット肝臓からTRIZOLでホモジナイズし、RNAを抽出しています。 (肝臓約100 mgに対し、TRIZOLを1 mLです) 1サンプルのみ抽出するなら、 「フリーザーから組織を取り出す → 素早く約100 mgを量り、チューブに入れる → TRIZOLでホモジナイズ」 と話はシンプルだと思いますが、仮に10サンプル抽出するとしたら、皆さまでしたらどのような順番で行いますか？ 単純に、上記「」の作業を10回繰り返すのは、 実験室を常にうろうろする事になりホコリがたちそうですし、フリーザーを何回も開閉するのも気が引けます。 「10サンプル全てをチューブに入れる → 全てのチューブにTRIZOLを加える → 1サンプルずつホモジナイズしていく」あたりが現実的かと思います。 しかし、TRIZOLを加えたとはいえ、ホモジナイズ前の組織のRNAが分解しないか懸念してしまいます。(組織表面はともかく、組織の内部にまではTRIZOLが浸透(？)しなさそう) どうか皆さまのお知恵をお貸しいただければ幸いです。

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