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(無題) 削除/引用 No.10903-3 - 2022/10/31 (月) 09:54:33 - あい あふさん 情報不足で大変申し訳ございません。 transwellを使ってmigration assayをしています。 細胞種→がん細胞株、播種密度→100000cells/0.33cm²、ウェルの大きさ→24well、ポアの大きさ→8.0µm 染色に関して→上を染めています。切り出しはしていません。固定前のPBSでの洗浄も行っていません。 方法に関して→内側に残った染色液をぬぐっています。 観察に関して→ところどころ抜けてしまいます。 何かご存知でしたらご教授頂けると幸いです。

(無題) 削除/引用 No.10903-2 - 2022/10/30 (日) 23:52:48 - あふ ＞トランスウェルの実験で トランスウェルで、なにを、どうしているんでしょうか？ 細胞を培養しているんですか？ トランスウェルは便利な道具なので、非接触共培養をしたり、遊走能を見たり、両面培養をやったり、気相と接触させたり、いろいろと使いみちがあります。どういった実験をされていますか？ 材料に関して 細胞種、播種密度、ウェルの大きさ、ポアの大きさ 染色に関して 染色は上を染めてるのか下を染めているのか（書き方からすると上部チャンバー（インサートのほう）を染めているようですが、膜を切り出しているわけではないのでしょうか？） 固定前にPBSなどで洗浄していないようですが、なにか特別な理由がありますか？ 方法に関して 綿棒で内側をこすりとるというのはなにをこすり取っているのか？ 封入の方法は？ 観察に関して どういう倍率で観察して、どういう大きさで白抜けしているのか？ 全体が真っ白で細胞が全くいないのか、円形にところどころ抜けるのか もう少し情報がほしいですね

transwell 削除/引用 No.10903-1 - 2022/10/28 (金) 14:31:01 - あい お疲れ様です。 トランスウェルの実験で、染色後にchamberを観察すると大きく白抜けした箇所ができてしまいます。泡などの影響でしょうか、どなたかご経験ございますでしょうか。 工程は以下の通りです。 ➀chamberに入った培地を破棄 ⓶ディフクイックで固定・染色（3分ずつ）してミリQに浸す �B綿棒で内側をこすりとる �Cしばらく乾かして観察 もしご存知でしたらご教授頂けると幸いです。

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