Bio Technical フォーラム

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マトリゲルのコーティングの仕方 トピック削除
No.10896-TOPIC - 2022/10/25 (火) 19:33:42 - あい
お疲れ様です。

invasion assayをする際、upper chamberにマトリゲルをコーティングする工程(量、インキュベート時間、洗浄過程など)をどなたかご存知ないでしょうか。もともとコーティングしてあるインサートを購入すればいいのですが、非常に高価なためできれば研究室にあるマトリゲルを使って実験できればと考えております。

研究室にあるマトリゲルはCORNINGのMatrigel🄬Matrixで、upper chamberは直径6.5mm(培養面積0.33cm²)ポアサイズ8.0のものです。

ご教授のほどよろしくお願い致します。
 
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No.10896-4 - 2022/10/26 (水) 17:32:08 - あい
有難うございます。

おおさん 有難うございます。おっしゃる通りです。添付して頂いたものを参考にさせて頂きます。

1さん 有難うございます。メーカーに問い合わせたところ、コーティング済の商品の方を勧められ、自分ではしないほうがよいと言われました。仕方ないです。

(無題) 削除/引用
No.10896-3 - 2022/10/26 (水) 12:42:47 - 1
メーカーのカスタマーサポートや学術部門に聞くのが一番確実ではないでしょうか?webなどで公開している以外にも多くの検討してると思うし、たぶん当該製品については一番知っていると思うので。マトリゲルに薬剤などを混ぜるとかだとコーティングから自分しないといけないので、質問にあるような場面に遭遇することも想定されているのではと思うので。

マトリゲルを扱う上での一般的な話としてですが、マトリゲルは低温では液状ですが、常温になると(常温にに近づくと)固化するので、使用するチップ等の器具はあらかじめ冷しておき、一連の作業は氷上など低温で行うのと、泡が入りやすいのでピペッティングとかはなんかそれ用のやり方があったような記憶があります。

(無題) 削除/引用
No.10896-2 - 2022/10/26 (水) 00:45:14 - おお
link.springer.com/protocol/10.1007/978-1-61779-207-6_8#Sec2_8
www.jbc.org/article/S0021-9258(20)58953-9/pdf
link.springer.com/protocol/10.1007/978-1-4939-7144-2_23#Sec5

文献検索とか参考にした文献などからリファレンス、必要があればその文献から更に孫引きはできませんか?

文献によって濃度などに差がありますが、、、ということはここでプロトコールだけ示されてもあなたにあったものかどうかわからないですよね。

マトリゲルのコーティングの仕方 削除/引用
No.10896-1 - 2022/10/25 (火) 19:33:42 - あい
お疲れ様です。

invasion assayをする際、upper chamberにマトリゲルをコーティングする工程(量、インキュベート時間、洗浄過程など)をどなたかご存知ないでしょうか。もともとコーティングしてあるインサートを購入すればいいのですが、非常に高価なためできれば研究室にあるマトリゲルを使って実験できればと考えております。

研究室にあるマトリゲルはCORNINGのMatrigel🄬Matrixで、upper chamberは直径6.5mm(培養面積0.33cm²)ポアサイズ8.0のものです。

ご教授のほどよろしくお願い致します。

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