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(無題) 削除/引用 No.10878-6 - 2022/10/18 (火) 10:13:28 - Luc 皆様、ご回答をいただき、ありがとうございます。 >蛍光ではなく発光？ 確かに化学発光でした・・・失礼いたしました。 >おお様 プロトコール/マテメソをご提示いただき、ありがとうございます。 各々価格帯が異なるもので、可能であれば安価なカリウム塩を選択したいと考えておりました。 まずはカリウム塩を購入して試用してみようかと思います。

(無題) 削除/引用 No.10878-5 - 2022/10/18 (火) 01:41:33 - おお ATPの濃度をはかるとかいう場合カリウム塩が多いように思います。 .med.upenn.edu/robertsonlab/assets/user-content/documents/Luciferin%20Protocol.pdf.pdf .ohsu.edu/sites/default/files/2019-04/Luciferin-Preparation.pdf bmcbiotechnol.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12896-019-0528-4#Sec9 マテメソから商品を検索するとカリウム塩だとわかります。 個人的感覚ではおそらくそれぞれそんなに違いは出ないと思いますけど、保証はしません。考慮する点としては、アッセイをする中でルシフェラーゼ以外の酵素やたんぱくのKやNaへの相性とかもあるかもしれませんが、終農度が数百uMでしょうから、生理的塩濃度から比べてそんなに大きな量でもなさそうです。もちろん生理的というよりも、その酵素や系の特徴に合わせた塩濃度、塩の選択をしている場合もあると思います。 D-ルシフェリンの場合溶かすと酸性に偏ってしまうか、溶けにくい可能性があります。以下のURLでは１mMストックを作るのにNaOHを加えてます（状況によってはKOHのほうがいいのかもしれません）。 med.emory.edu/departments/pharmacology-chemical-biology/murphy-lab/docs-images/lucassay.pdf

(無題) 削除/引用 No.10878-4 - 2022/10/17 (月) 17:26:16 - ち 蛍光ではなく、生物発光というか化学発光ですね。

(無題) 削除/引用 No.10878-3 - 2022/10/17 (月) 17:15:16 - え 蛍光ではなく発光？

sxdcrvtyh 削除/引用 No.10878-2 - 2022/10/17 (月) 15:04:54 - vbhjいおp 専門外だけどたぶんこんなことではないかなと、 ルシフェリンはカルボキシル基のところがつまりCOOHなので水に溶けると解離してH +が生じる。なので適当なbufferを使用しないと濃度によってはpHに影響することがあるかもしれない。 ルシフェリんNaはCOONaなので水に溶けるとH +でなくてNa +が生じる。なのでpHにはあまり影響ない。 ルシフェリンKはCOOKなので水に溶けるとH +でなくてK +が生じる。なのでpHにはあまり影響ない。 とりあえず３つのルシフェリンの構造式を見るのが良いかと。

ルシフェリンの違い？ 削除/引用 No.10878-1 - 2022/10/17 (月) 11:53:07 - Luc 蛍光基質としてルシフェリンの購入を検討しています。 各メーカーのサイトを見ていると、 ・D-ルシフェリンナトリウム塩 ・D-ルシフェリンカリウム塩 ・D-ルシフェリン の3種が売られており、価格も各々異なります。 溶媒への溶解性が異なることは理解したのですが、その他、「これはこのアッセイに不適」などの情報があれば、ご教示いただけないでしょうか。

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