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(無題) 削除/引用 No.10862-3 - 2022/10/12 (水) 11:59:16 - Ggr https://www.promegaconnections.com/tag/pcr-cloning/ Q: Can PCR products generated with GoTaq DNA Polymerase be used to for T- vector cloning? A: Yes. GoTaq® DNA Polymerase is a robust formulation of unmodified Taq Polymerase. GoTaq® DNA Polymerase lacks 3’ →5’ exonuclease activity and displays terminal transferase activity that adds a 3′ deoxyadenosine (dA) to product ends. As a result, PCR products amplified using GoTaq® DNA Polymerases (including the GoTaq® Flexi and GoTaq® G2 polymerases) will contain A-overhangs which makes them suitable for T-vector cloning with the pGEM®-T (Cat.# A3600), pGEM®-T Easy (Cat.# A1360) and pTARGET™ (Cat.# A1410) Vectors.

(無題) 削除/引用 No.10862-2 - 2022/10/12 (水) 11:52:43 - G25 使用されている酵素はTaqですし、校正活性を強化しているという能書きもないですから、活性は3'末端にdAが付加も含め普通のTaqと同様でしょう。 余談ですけど、 Taqに校正活性のある酵素をブレンドしているTakara ExTaqでも、全部のPCR産物が平滑末端になるわけでなく大部分はdA突出を持つのでTAクローニングができるとうたってますね。

GoTaq Flexi DNA PolymeraseとTAクローニング 削除/引用 No.10862-1 - 2022/10/12 (水) 11:32:50 - パワハラされたら直に訴えます GoTaq Flexi DNA PolymeraseでPCR増幅した産物をT vectorにクローニングしようとしています。 通常Takaraのtaqであれば3'側にAが付加されると認識していますが、GoTaq Flexi DNA Polymerase（promega）でも3'末端にA付加されますでしょうか。

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