Bio Technical フォーラム

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浮遊性細胞の染色プロトコル トピック削除
No.10846-TOPIC - 2022/10/06 (木) 18:54:19 - kg
浮遊性細胞の蛍光染色をトライしています。
球状形態を保つため、カバーグラスに固定せずに、チューブ内で作業し、最後に封入剤と混ぜる予定です。
しかし、プロトコルに従って、進めているのですが、トライトン処理を行うと、ペレットがほぼ見えなくなるのですが、解決策はありますでしょうか？
　
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(無題) 削除/引用
No.10846-4 - 2022/10/07 (金) 22:58:13 - あの
TRITON無しでも、案外、PFA 固定だけで細胞膜に穴があくので
試してみたらいかがでしょうか？

(無題) 削除/引用
No.10846-3 - 2022/10/07 (金) 18:48:54 - おお
膜に穴が空くぐらいでいいはずなので、Trionの濃度を下げる（CMC以下で理屈上十分）か弱い界面活性剤に変更すればいいかもしれませんジギトニンとかTweenとか。BSA入れてなければ入れたら変わる、、、かな？

(無題) 削除/引用
No.10846-2 - 2022/10/07 (金) 08:39:42 - q
iPGellとかSmear Gellはどうですか

浮遊性細胞の染色プロトコル 削除/引用
No.10846-1 - 2022/10/06 (木) 18:54:19 - kg
浮遊性細胞の蛍光染色をトライしています。
球状形態を保つため、カバーグラスに固定せずに、チューブ内で作業し、最後に封入剤と混ぜる予定です。
しかし、プロトコルに従って、進めているのですが、トライトン処理を行うと、ペレットがほぼ見えなくなるのですが、解決策はありますでしょうか？
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