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エレクトロポレーション導入の際のsiRNA濃度 トピック削除
No.10845-TOPIC - 2022/10/06 (木) 17:32:22 - siRNA
皆さんはどうされていますか?

培養細胞にsiRNAを導入する際の終濃度はおおよそ1-10 nMと考えていますが、エレポで導入する場合、例えば100マイクロリットル細胞懸濁液にsiRNAを混ぜて通電し、その後medium 1.9 mlに滴下して最終液量2 mlで培養したりします。

siRNAの終濃度1-10 nMの設定は100マイクロリットル時のボリュームに合わせるのでしょうか? それとも2 mlに合わせるのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.10845-5 - 2022/10/08 (土) 13:32:58 - siRNA
https://www.thermofisher.com/blog/learning-at-the-bench/guidelines-and-optimizing-for-rna-transfection/#siRNA-5

このページのsiRNAの量の項目です

(無題) 削除/引用
No.10845-4 - 2022/10/08 (土) 10:54:27 - おお
リンクください

(無題) 削除/引用
No.10845-3 - 2022/10/08 (土) 09:44:56 - siRNA
>[Re:2] おおさんは書きました :
> 100uLのときを基準で考えるのだと思います。
> 例えばポレーション後、3まいのDishesにまくのと、1枚にまくときで、ポレーション時の濃度が違ってしまうのはおかしいと思いませんか?


有難うございます。
自分で調べてみるとThermoFisherのウェブページでは100 ulの時に濃度を合わせて、エレポの場合は0.5-2 uMくらいとかなり高濃度でやるような事が記載されていました。

(無題) 削除/引用
No.10845-2 - 2022/10/07 (金) 18:40:57 - おお
100uLのときを基準で考えるのだと思います。
例えばポレーション後、3まいのDishesにまくのと、1枚にまくときで、ポレーション時の濃度が違ってしまうのはおかしいと思いませんか?

エレクトロポレーション導入の際のsiRNA濃度 削除/引用
No.10845-1 - 2022/10/06 (木) 17:32:22 - siRNA
皆さんはどうされていますか?

培養細胞にsiRNAを導入する際の終濃度はおおよそ1-10 nMと考えていますが、エレポで導入する場合、例えば100マイクロリットル細胞懸濁液にsiRNAを混ぜて通電し、その後medium 1.9 mlに滴下して最終液量2 mlで培養したりします。

siRNAの終濃度1-10 nMの設定は100マイクロリットル時のボリュームに合わせるのでしょうか? それとも2 mlに合わせるのでしょうか?

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