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抗原特異的マウスヘルパーT細胞の活性化 トピック削除
No.1082-TOPIC - 2012/10/31 (水) 17:04:59 - 免疫
マウスにワクチンタンパクを投与後、回収した脾細胞を活性化させ、FACSでサイトカインなどを調べようと考えています。コントロールにはワクチン非投与マウスを使用します。

質問は脾細胞の活性化方法で、in vivoで使用した同一タンパクを使って刺激するか、それともマイトジェンなどの非特異的な方法で刺激する方が良いのか悩んでいます。
どちらが良いかと言えば、当然同一タンパクを使用する方だとは思いますが、
仮にマイトジェンを使用し、両マウスのサイトカイン産生に差があったとすれば
抗原特異的な反応と判断しても良いのでしょうか。

ご回答宜しくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1082-5 - 2012/11/01 (木) 14:22:37 - 免疫
>田舎者さん
タンパクのみの投与であれば(通常T細胞の反応見にくいですが)、マイトジェンなどの非特異的な方法でも、蛋白投与によって分化したT細胞からのサイトカイン分泌と判断できるのでは・・・。

ありがとうございます。
アジュバントは含んでいません。
一応、そのタンパク自体が免疫活性を持っていることは以前から分かっているのでマイトジェンを用いた方法で解析しようと思います。

無題 削除/引用
No.1082-3 - 2012/11/01 (木) 12:43:54 - 田舎者
ワクチンタンパク投与時、アジュバントを使いますか? 例えばCFAなど。そうであれば、CFA中の結核菌に対する反応と区別するために、抗原特異的な刺激が必要です。タンパクのみの投与であれば(通常T細胞の反応見にくいですが)、マイトジェンなどの非特異的な方法でも、蛋白投与によって分化したT細胞からのサイトカイン分泌と判断できるのでは・・・。

(無題) 削除/引用
No.1082-2 - 2012/11/01 (木) 01:18:49 - ami
それは抗原トクイテキとは言えないのでは。テトラマーかなにかで抗原特異的tをエンリッチでもしてるならまだしも。という印象です。

抗原特異的マウスヘルパーT細胞の活性化 削除/引用
No.1082-1 - 2012/10/31 (水) 17:04:59 - 免疫
マウスにワクチンタンパクを投与後、回収した脾細胞を活性化させ、FACSでサイトカインなどを調べようと考えています。コントロールにはワクチン非投与マウスを使用します。

質問は脾細胞の活性化方法で、in vivoで使用した同一タンパクを使って刺激するか、それともマイトジェンなどの非特異的な方法で刺激する方が良いのか悩んでいます。
どちらが良いかと言えば、当然同一タンパクを使用する方だとは思いますが、
仮にマイトジェンを使用し、両マウスのサイトカイン産生に差があったとすれば
抗原特異的な反応と判断しても良いのでしょうか。

ご回答宜しくお願いします。

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