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(無題) 削除/引用 No.10799-9 - 2022/09/26 (月) 16:34:54 - noname 引き続き情報をくださった皆様 とても参考になる情報ありがとうございます。 トピック作成時にpassを入れるのを忘れたので解決マークはつきませんが、 ひとまず、このトピックは解決とさせていただきたいと思います。 重ねてお礼申し上げます。

(無題) 削除/引用 No.10799-8 - 2022/09/24 (土) 17:26:56 - zam 既に結論が出ていますがついでに。 https://www.gls.co.jp/technique/technique_data/lc/usage_of_hplc/P2_6.html クロマト会社のGLサイエンスのweb記事によれば 減圧で5〜15分、超音波で5〜10分、減圧+超音波で1〜2分、とのこと。 いずれもやり過ぎによる組成変化に注意ですね。

(無題) 削除/引用 No.10799-7 - 2022/09/24 (土) 00:47:42 - おお Add excess of degassed water and degass the suspension under vacuum for at least 5 min (see Note 2). M E T H O D S I N M O L E C U L A R B I O L O G Y、Vol. 147 p90- https://link.springer.com/content/pdf/10.1007/978-1-60327-261-2.pdf

(無題) 削除/引用 No.10799-6 - 2022/09/24 (土) 00:42:14 - おお and degas for 5 min at room temperature using vacuum filtration with stirring. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3157887/ FiltrationしたときのVacuumで５分ぐらいFiltrationのあと放置しているみたいです。

(無題) 削除/引用 No.10799-5 - 2022/09/22 (木) 17:48:06 - vgy 泡出なくなったらOKということで良いのでは。頑張って脱気しても時間経てばまた酸素や二酸化炭素が溶け込んでいくし。ルーチンでクロマトを稼働させてるような研究で、手間かけずに、かつ確実に脱気をしたいならばon line degassorみたいな装置をルートのはじめの方に入れるとかした方が良いと思う。on line degassorは普通のならば8万円〜１５万円くらいで売ってる。

(無題) 削除/引用 No.10799-4 - 2022/09/22 (木) 15:43:57 - noname ご回答いただいた皆様 ご回答ありがとうございます。 引いてて泡が見え無くなればOKって感じですね。 私自身はその基準でやっていました。。。 アスピレーターもそんなに数がなく、1時間も占有されると困るので、 そんなにやらんでもいいみたいですよ、と根拠を紙媒体で示せればいいなぁと ご相談させていただいた次第です。 取り急ぎお礼申し上げます。

(無題) 削除/引用 No.10799-3 - 2022/09/22 (木) 14:06:55 - おお １０分もやれば十分です。しっかりと吸引できている状態で１時間もやると水が揮発した量でバッファー組成も変わりそう、、、 脱気は溶け込んだガスがカラム内とかで泡になったりしないようにするということで（非常に感度の高い検出とかだと話が変わってくるかもしれないけど）、論文というほど理屈が必要なものではないとおもいますが（方法論的なものならともかく）。英語ならDegasとかで検索すれば見つかるのでは？ 揮発性の高い溶液とか、そう言うものを溶かした水溶液であれば、アスピレーターより効率の悪いそにけーしょんを使うこともあるくらいだし。

(無題) 削除/引用 No.10799-2 - 2022/09/22 (木) 14:01:20 - G25 試料がタンパク質であれなんであれ、ガスの種類が酸素であれ何であれ関係なく、 移動相に溶け込んでいるガスが流路中で分離してアブクになるとまずいから、ですよね。 アスピレーターの吸引力もそれぞれちがうだろうから何分ならOKとは言えないけれど、 溶液から微細なアブクがあがって来るのが見えなくなるまでやれば良いと思います。うちでは、ソニケーションバス併用でアスピレーター吸引しながら他の準備もするので30分はやってると思うけど、もっと短くてもいいかも。

Buffer類の脱気 削除/引用 No.10799-1 - 2022/09/22 (木) 13:22:49 - noname CytivaのAKTAやBioRadのBioLogic等の中圧クロマトグラフィーシステムを使う時、バッファーの脱気をするのはセオリー通りだと思います。 脱気時間は皆さんどれくらいしていますでしょうか？ 私はタンパク質精製用であれば10分もアスピレーターで引いたら十分だと思っているのですが、ラボの他の人は1時間ひかないとという人もいます。 検索の仕方が悪いのか、溶液中の空気（酸素？）に関する論文や技術情報も特に見当たらず、ご存じの方がいらっしゃれば教えていただけるとありがたいです。

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