Bio Technical フォーラム

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ゲノム編集による点変異導入 トピック削除
No.10788-TOPIC - 2022/09/17 (土) 10:18:46 - yoshi
CRISPR/Cas9で染色体に点変異を導入したいと思います。
点変異をつけた修復断片を導入する際に、PAMも変えないと
修復されたのちにまた切断されてしまう可能性があると思います。

この点に言及された論文はあまりないように思いますが
いかがでしょうか。

よろしくお願いいたします。
　
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(無題) 削除/引用
No.10788-2 - 2022/09/17 (土) 11:18:39 - AA
認識配列が残っていればre-cutされるのは当然なのでいちいち言及していません。
変異導入後のゲノムだけではなく、donor断片が二本鎖だとそれ自体も消化されます。

大抵の場合は、認識配列内かPAMに目的の点変異が生じてミスマッチになるような設計にしていると思います。

ゲノム編集による点変異導入 削除/引用
No.10788-1 - 2022/09/17 (土) 10:18:46 - yoshi
CRISPR/Cas9で染色体に点変異を導入したいと思います。
点変異をつけた修復断片を導入する際に、PAMも変えないと
修復されたのちにまた切断されてしまう可能性があると思います。

この点に言及された論文はあまりないように思いますが
いかがでしょうか。

よろしくお願いいたします。
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