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Fast Western Blot Kits トピック削除
No.10779-TOPIC - 2022/09/15 (木) 09:06:01 - おお
Fast Western Blot Kits というのが出ているのに気が付きました。
ブロッキングと1次抗体のWashが省ける用でかなり手間が省けるようです。
使った経験のある方、使用感など教えていただけませんでしょうか?

また似た商品がほかからも出ているようですが、そういう情報もあれば助かります。
thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/western-blotting/detect-proteins-western-blot/western-blot-detection-reagents/specialty-western-blot-detection-kits/fast-western-blot-kits-performance-data.html
 
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(無題) 削除/引用
No.10779-6 - 2022/09/21 (水) 09:49:29 - wwn
Flexの方ならミディゲルサイズ対応です。
膜を置く場所はある範囲内に置くとう言うような感じですので多少サイズが違っても置けると思います。
デモ依頼ができるようなので一度試してみてはいかがでしょうか。
抗体を希釈するのはこれ用のSolution kitを使用しています。
ミニゲルサイズ使用時で、20mlの調整(5倍希釈液と、100倍希釈液を水で薄める)
うち一次抗体に2ml, 二次抗体に2mlを使用し、洗浄に2ml, 6mlを使用します。
5mlでCardを湿らせ、膜を密着させるように1ml使用します。
転写した膜を軽く水で洗浄し、湿らせたCardの上に密着させ蓋を締め各液を4つのwellに各溶液を順番に入れて終わりです。
他のbufferやブロッキング剤が使えるかはわからないです。(誰か試した人いますでしょうか?)

(無題) 削除/引用
No.10779-5 - 2022/09/21 (水) 01:56:11 - あの
なおバイオラッドのPVDFメンブレンの大きさは次です:

ミディ(8.5 x 13.5 cm)

ミニ(7 x 8.5 cm)

できればこれのミディサイズがiBind で使えるとありがたいです。

(無題) 削除/引用
No.10779-4 - 2022/09/20 (火) 23:15:43 - あの
iBindに興味があります。

すみませんが、2点、教えてください。

当方では既に、バイオラッドのTurbo blotterを導入して、主に
バイオラッドのレディメイドのミディゲルから、専用の転写パックを使って、
7分のプロトコルで転写しています。これはiBlot2に相当するモノなのだと思います。


(1) そのためiBlot2を購入せずに、iBindだけ新規購入して使うことは可能でしょうか?

(2) 時々 東洋紡のcan get signalを使っています。そのため、
第一抗体、ブロッキング剤、第二抗体を、ユーザーが調整したものでもiBindを使用できるでしょうか?

スレ主さんの質問とはずれていますが、よろしくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.10779-3 - 2022/09/20 (火) 19:07:42 - zam
うちもFast Western Blot Kitsは使ってませんが、iBlot2 & iBind はしょうっちゅう使ってます。
モノクロ抗体のスクリーニングで重宝しています。

(無題) 削除/引用
No.10779-2 - 2022/09/20 (火) 17:02:39 - wwn
返信がつかないので若干的外れですが、ここで話題になっていないようなので一つ紹介します。
従来法の改善試薬というわけではないですが、iBlot2, iBindを使用しています。
試薬代は高く付くかもしれませんが、いろいろ簡便になりました。
iBlotでは7分弱で膜への転写が終わり、iBindでは液をセットしただけで1.5時間ほどで二次抗体までの反応が終わります。この間は完全に放置です。
仕上がりも従来法よりバックグラウンドが抑えられ、S/Nは上がったように感じます。(比べたことはないです)
SDS PAGEから検出まで1日あれば十分終われます。
これは研究室を移ってもぜひ使いたいシステムの一つです。

Fast Western Blot Kits 削除/引用
No.10779-1 - 2022/09/15 (木) 09:06:01 - おお
Fast Western Blot Kits というのが出ているのに気が付きました。
ブロッキングと1次抗体のWashが省ける用でかなり手間が省けるようです。
使った経験のある方、使用感など教えていただけませんでしょうか?

また似た商品がほかからも出ているようですが、そういう情報もあれば助かります。
thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/western-blotting/detect-proteins-western-blot/western-blot-detection-reagents/specialty-western-blot-detection-kits/fast-western-blot-kits-performance-data.html

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