全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.10776-5 - 2022/09/15 (木) 09:52:31 - おお www.cisbio.com/flag-check-kit-40503 こんなんあったわ。

(無題) 削除/引用 No.10776-4 - 2022/09/14 (水) 18:32:33 - T-2 おそらく生細胞での検出は難しいので細胞を一部掻き取って SDS入りバッファーでボイル、ドットブロットが一番簡単じゃないですかね。

(無題) 削除/引用 No.10776-3 - 2022/09/14 (水) 12:44:24 - 独り言 しいて言えば、過剰発現であれば、ウエスタンでも検出しやすいと思うので、 細胞回収からウエスタンまで簡略化した方法にするのが一番よいかと。融合タンパク質の大きさをチェックすることも、大事な発現チェックだし。 96ウェル半分程度の細胞を、サンプルバッファで直接ボイルして、 そのまま多検体ようの横長のゲルで泳動して、トランスファーして、anti-Flag-HRPで速攻で発色。 もし予算があるなら、泳動後のゲルをanti-Flag蛍光抗体と蛍光の撮影装置でin gel westernとかできれば、操作は短そう（やったことないけど）。

(無題) 削除/引用 No.10776-2 - 2022/09/14 (水) 01:46:12 - おお 難しいです。 生細胞でなくて、固定して蛍光ラベルしたFLAG抗体で免疫染色がWBほど煩わしくないかもしれません。

Flagタンパク質の発現の有無 削除/引用 No.10776-1 - 2022/09/13 (火) 18:17:08 - GCP Flagタンパク質が発現していることを生細胞の時点で確認することは難しいですよね。 大量のコンストラクトを作成しているのですが、毎回Westernで調べるのが億劫でして、、、

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---