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(無題) 削除/引用 No.10769-3 - 2022/09/11 (日) 06:47:22 - asan 完全に殺すなら、確実に全滅する濃度にしないと、わずかに生き残った細胞が増えてきますよ。 濃度って細胞数とかスケールによって多少効き方がかわることもあるから、自分は極端じゃなければ条件の範囲で確実にしにそうなあたりに設定してやることが多いけどね。通常の目的で、それで強すぎて全滅だってことはないです。 際どい発現のものを取りたいとか、セレクションの抗生剤をケチりたいとかそういう理由があるなら別かもしれませんが。

(無題) 削除/引用 No.10769-2 - 2022/09/10 (土) 14:37:05 - おお ２００から３００の間にあるなら、３００では死滅するってことだよね。いずれにしろそのあたりで効果が顕著に見られるなら、その量でずっと飼っていると、インテグレートしなかった細胞は脱落していくので、セレクションは可能です。 かといって４００が高すぎるとも思わない、導入効率や発現させる遺伝子の細胞への影響、発現させたい量等によってどれくらいで選択するか決めるものだと思っている。ディッシュを３枚用意して３００、４００、５００とかであるいは３００、４５０、６００というように濃度を振っておいて、高い濃度で増えてきたらそれを使うし、そうでなかったらそれより低い濃度のものから拾うという工夫もありだと思います。

抗生剤の至適濃度の決定 削除/引用 No.10769-1 - 2022/09/10 (土) 13:27:10 - えいじろう 安定発現株を作成するための予備実験として、抗生剤の至適濃度の決定を行っています。 概ね細胞が生存できる濃度と死亡に傾く濃度が分かってきたのですが、最終的にどの濃度を安定株の作成に用いるのでしょうか？ 200-300ng ml に生存率の境界があるなら、少し余裕をもって400ng にしたりするものでしょうか?

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