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(無題) 削除/引用 No.10758-3 - 2022/09/07 (水) 01:58:36 - おお 疎水性の高い場所をカバーすることができるので、ある種ブロッキング効果はあると思います。Tween20は膜の可溶化能力などは非常に低い弱い界面活性剤なのでいろいろなものを溶出してしまう可能性は低いと思います。ELISAなどでもたんぱくを底に吸着させておいて、界面活性剤を使うと溶出してしまいそうな感じですが、Tween20を使うことはまあまああるのでは？ まあ、なくてもうまくいくかと言われるとうまくいくことは多いでしょう。

(無題) 削除/引用 No.10758-2 - 2022/09/06 (火) 16:26:33 - G25 >界面活性剤であり、細胞内部にエピトープが存在する場合に抗体の細胞透過性を高めるために使用する とは限らなくて、界面張力を下げて（まさに界面活性剤の仕事）液の馴染み、広がり、浸透をよくするとか、もちろん洗い流しの効果を高めるとかを意図して使われる方が多いと思います。 細胞膜の透過性を高めるのを目的とするなら、Tween 20よりTriton X-100やNP-40なんかのほうが好まれると思いますし、濃度ももっと高く設定するでしょう。0.05% Tween20はそういう効果じゃなくて、先述したような界面張力を下げることを意図しているのでしょう。 アセトン固定は架橋ではなく脱水による固定ですが、脂質をよく溶かすので細胞膜はスカスカになっているはず。たとえ細胞内に標的があっても、界面活性剤によってさらに穴あけする必要はないでしょう。 逆に、膜タンパク質が標的の場合、界面活性剤や有機溶媒で細胞膜を溶かしちゃうと、膜タンパク質が流出してしまう危険もありますね。

IHCでのTween20の必要性 削除/引用 No.10758-1 - 2022/09/06 (火) 15:12:57 - s 凍結切片を用いた免疫組織化学染色について質問があります。 冷アセトン固定 ↓ PBSで洗浄 ↓ 0.05%Tween20含有PBSで1回洗浄 ↓ スキムミルクによるブロッキング ↓ 抗体反応（直接法による蛍光標識） という流れで実験を行なっています。 CD抗原を評価します。 質問ですが、Tween20含有PBSで洗浄する必要はあるのでしょうか。 Tween20は「界面活性剤であり、細胞内部にエピトープが存在する場合に抗体の細胞透過性を高めるために使用する」という認識なので、CD抗原の場合は必要ないのではないか、と疑問に感じています。 基礎的な理解ができておらず申し訳ありません。 ご教示いただけますと幸いです。

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