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(無題) 削除/引用 No.10750-5 - 2022/09/08 (木) 11:21:57 - cellec たくさんのアドバイスをありがとうございます。とても参考になりました。 評価対象成分の兼ね合いもあり、分化培地は専用のもの（キット化されたもの）を使う予定ですが、増殖用培地の方は、より一般的というか、使用経験のあるものを使えないか、と思案しておりました。 ストック細胞をもらえる伝手があり、まず、DMEM（low glucoose）での培養を試してみようと思います。 所持しているFBSが適合すると良いのですが。 この度はありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.10750-4 - 2022/09/08 (木) 00:59:50 - おお コメント書いて送ったつもりでいたけど、アップされてないね、、、書くだけ書いて送ったつもりになってたみたい。 いろいろ文献をあたってほしいと思うのだけど、そういう実験をしない私が片手間に調べたところ、 DMEM（確かにLow glucoseというかHighじゃないオリジナルの濃度のもの） alphaMEM DMEM＋Nonessential amino acid DMEM・F12（１：１） に血清を加えたものをよく見かける。 ただ、顕著に血清のロットの影響を受けるようで、human platelet lysateに置換えたほうがいいという話もあるようです。またメーカーに寄ってはhMSCに向いている血清ロットをMedium kitみたいにしてうっているみたい。そういうのもあって市販のものは高くついているような気がしないでもない。 その他臨床などを見据えたAnimal freeとかいろいろ工夫された培地とかあるようだけど。 そういうのもコンポジションを探れば文献で見るかるかもしれない（あるいは特許でおさえているか）。human platelet lysateのたんぱく成分は大体明らかにされていて、それぞれのたんぱく成分を精製したものを加えても不十分なようで、少量の血清を加える用になっているものもあるような気がする。 human platelet lysateは臨床でを見据えた Xenogenic-Free の条件が念頭にあるようだけど、牛でも細胞を増やして基礎の研究するにはOKみたいだ。商品として手に入るのだろうか。 https://reader.elsevier.com/reader/sd/pii/S1465324919306437?token=3162BE7F24BA5A43F8B68219F28308AB927D308F5031D9DDE5E77BACAC5309B8362BFD76245224A83D0B8EA43F578B70&originRegion=us-east-1&originCreation=20220907155103 ADULT BOVINE PLATELET LYSATE-DERIVED SERUM “NEOSERA” IS SAFE, LESS ETHICAL AND POWERFUL ALTERNATIVE TO FETAL BOVINE SERUM FOR THE CULTURE OF MESENCHYMAL STEM CELLS 個人的には細胞を得たときに推奨されている（あるいはその細胞を維持継代していた）培地で一旦増やしストックを取りながら、DMEM＋血清でロットを探りながら培養が可能であればそれで進めて行くだろうなと思います。

(無題) 削除/引用 No.10750-3 - 2022/09/05 (月) 18:28:46 - あふ AD-MSCは10％DMEMで培養OKです。グルコース1000gのものが良いと思います（4500でも培養できますが、なんか変な感じがする）。状況によってはDMEM/F12で培養したりもします。 分化誘導はPromocellのRtUが使い勝手が良かった覚えがありますね。

(無題) 削除/引用 No.10750-2 - 2022/09/05 (月) 18:25:02 - み キットは過去に樹立された手法を元に作製されているはずなので、文献調べれば幾らでもDMEM-baseの組成は見つかります。

hMSCの増殖用培地 削除/引用 No.10750-1 - 2022/09/05 (月) 14:56:42 - cellec ヒト間葉系幹細胞（脂肪組織由来）を用いた実験を計画しています。 hMSCを骨や脂肪の細胞に分化させる際の試薬は、だいたい目星がついているのですが、分化させる前の増殖用培地で迷っています。 各メーカーから専用培地が販売されていますが、組成の詳細が非公開だったり、実験条件を工夫しづらい感じがしています。 例えば、10% FBS入りのDMEMで培養することは可能でしょうか？

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