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細胞の遠心について
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No.10728-TOPIC - 2022/08/25 (木) 10:26:53 -
ぱん
細胞にある遺伝子を導入したところ、遠心分離をしたときに細胞が底に沈みにくくなり、チューブの壁に付着するようになりました。
これはどのような現象が起きていると考えられますでしょうか。
ご教示いただけますと幸いです。
よろしくお願いします。
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No.10728-11 - 2022/08/31 (水) 15:16:20 - Sd.Kfz.161/4
単球とかあつかってますが、アングルはほとんど沈殿しないですね
(無題)
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No.10728-10 - 2022/08/31 (水) 02:30:26 - おお
細胞が遠心で回収しにくくなったというケースは個人的にはないので、ちょっと違和感をかんじます。唯一ありえるなら脂肪を相当蓄えたときぐらいかなと想像の範囲内では考えています。
アングルローターなら確かに横につくといったことはあるかもしれません。それなら遠心する前に静置しておくとそれだけで沈んでくるので底に溜まりやすくなると思います。
(無題)
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No.10728-9 - 2022/08/29 (月) 14:27:50 - njk
スィングローターで1000xgとアングルローターで1000xgとでは違いますか。同じ遠心力、時間でもアングルローターだとなんかイマイチ沈殿しにくい気がしています。
(無題)
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No.10728-8 - 2022/08/29 (月) 14:14:35 - momo
ローターはスウィングですか、アングルですか?アングルなら、細胞の付着性が変わったせいではないですか?
(無題)
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No.10728-7 - 2022/08/28 (日) 14:54:41 - vbふい
たぶん比重が変化したということかなと。導入(発現)有り無しで脂質プローブで染色して比較してみたらどうでしょうか。それか、接着因子やその受容体などの発現変化に伴い器壁への接着が大きく亢進したか。
あと細胞のサイズは変化してませんか。
細胞数が少なすぎると沈殿しにくい気は昔からしてます。ミクロな視点では沈降する際にある程度細胞はアグった状態になっているのではないかと思うので、濃度が低いとそうしたことが起こりにくいからかなと。
(無題)
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No.10728-6 - 2022/08/25 (木) 14:45:45 -
ぱん
ベクターコントロールでは起きないので、導入された遺伝子によるものかと考えています。細胞はNIH3T3です。
(無題)
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No.10728-5 - 2022/08/25 (木) 13:22:03 - おお
どんな遺伝子かわからないけど、脂肪細胞に分化したとか。回収できなくなった量と導入効率に相関性がありそうですか?
(無題)
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No.10728-4 - 2022/08/25 (木) 12:32:54 -
TS
ベクターコントロール?でも起きるのですか。
(無題)
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No.10728-3 - 2022/08/25 (木) 12:20:37 -
ぱん
774Rさん
ご返信ありがとうございます。
顕微鏡で見たところでは死細胞はほとんどありませんでした。
(無題)
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No.10728-2 - 2022/08/25 (木) 11:49:37 - 774R
トランスフェクション等で死細胞が生じ、それらは比重が低いからとか?
細胞の遠心について
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No.10728-1 - 2022/08/25 (木) 10:26:53 -
ぱん
細胞にある遺伝子を導入したところ、遠心分離をしたときに細胞が底に沈みにくくなり、チューブの壁に付着するようになりました。
これはどのような現象が起きていると考えられますでしょうか。
ご教示いただけますと幸いです。
よろしくお願いします。
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