Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

細胞の形態観察 トピック削除
No.10679-TOPIC - 2022/08/02 (火) 18:45:00 - ららら
細胞をSEMで観察したいのですが、つぶれた感じの形になってしまいきれいに観察できません。

現在グルタルアルデヒドで固定後、エタノールで希釈系列を作り脱水させ、大気乾燥の後観察しております。

なにかアドバイスいただけますと幸いです。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.10679-4 - 2022/08/02 (火) 19:50:26 - toto
G25さんのいわれるとおりで、今では主流はtButylアルコールに最終的に置き換えて凍結乾燥です。エタノール置換後の自然乾燥では表面張力のために縮みます。
ともかくtButylよりも液化炭酸ガスを使う臨界点乾燥のほうがより乾燥時の影響は少なく微細構造が保たれますけどね。高圧が必要で機器を定期点検してないと叱られることもあって段々使われなくなりました。

(無題) 削除/引用
No.10679-3 - 2022/08/02 (火) 19:19:28 - G25
細胞の場合はよく知らないけれど、一般的なSEM標本作成ではt-Butyl Alcoholに置換して穏和な冷却で固相化、減圧して昇華させて抜くというのがトレンドじゃないでしょうか。昔は臨界点乾燥で二酸化炭素で置換して固相から昇華させるのが常法でしたけど。

水とかエタノールのような比較的表面張力の高い溶媒で置換しそれを液相から揮発させると、溶媒の体積が減るのに引っ張られて試料の構造がつぶれます。そのために固相から昇華させるのが望ましいのだと理解しています。

ちなみに、t-Butyl Alcohol法が世に出る前、臨界点乾燥のかわりに、フロンのような表面張力の低い溶媒で置換し、減圧乾燥で抜くという方法も出ていて使ったこともあるんですが、あまり普及しなかったようです。

細胞の形態観察 削除/引用
No.10679-1 - 2022/08/02 (火) 18:45:00 - ららら
細胞をSEMで観察したいのですが、つぶれた感じの形になってしまいきれいに観察できません。

現在グルタルアルデヒドで固定後、エタノールで希釈系列を作り脱水させ、大気乾燥の後観察しております。

なにかアドバイスいただけますと幸いです。

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。