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(無題) 削除/引用 No.10678-9 - 2022/08/04 (木) 18:07:23 - ema 最近は色々試薬も売っています。 file:///C:/Users/Fujiwara%20Mari/Downloads/PLS_cell_selection_fyler.pdf

(無題) 削除/引用 No.10678-8 - 2022/08/03 (水) 16:01:22 - yu 分かりました。 血液サンプル同様フィコールを使用し、分離を行ってみます。 ご教授いただきありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.10678-7 - 2022/08/03 (水) 12:47:54 - 774 血性成分が少なければ溶血だけで良いでしょうが、多すぎてうまくいかないなら末梢血に倣って行えば良いと思う。 溶血の条件を検討という考え方もあるけれど、結局リンパ球が取れれば良くて試薬もあるのだから。 うちではヒトサンプル(そもそもの量が多い)ですが癌性胸水からのリンパ球分離も末梢血と同様に行っています。

(無題) 削除/引用 No.10678-6 - 2022/08/03 (水) 12:27:13 - yu フィコールは末梢血の時しか使用していません。 手持ちの教科書では溶血のみで分離していたので、可能かと思っていました。 ありがとうござます。

(無題) 削除/引用 No.10678-5 - 2022/08/03 (水) 10:50:02 - 774 フィコール等を用いた密度勾配遠心分離法ではやっていないのですか? それともLeucosepのようなチューブかバキュテイナ採血管のようなものを使っていますか? それともただPBSで希釈しただけで遠心? だったら溶解液を入れても赤血球が多すぎるのも当然だけど。

(無題) 削除/引用 No.10678-4 - 2022/08/02 (火) 21:26:47 - yu 回収した血性腹水(約3-4ml)にPBSを加え10mlにしたのち、遠心分離しています。 その後上清を吸引し、RBC lysis bufferを5ml加え懸濁、室温で5分放置。 PBSを5倍加え遠心しています。

(無題) 削除/引用 No.10678-2 - 2022/08/02 (火) 18:33:36 - 774 実際今どのようなプロトコルでやっているのかお書きください。 もうやっていることを提案しても仕方ないので。 フィコール等だけで赤血球を完全に除外するのは困難なので赤血球溶解液を使うものだけど、使ってますか? ↑こういう確認が手間なので、最初に書いておいて欲しいのです。

血性腹水のリンパ球分離 削除/引用 No.10678-1 - 2022/08/02 (火) 16:58:58 - yu 腹水からリンパ球を分離し、フローサイトで解析を行っています。 血性腹水の貯留したマウスで腹水を回収し、解析していますが、血性成分が強く、赤血球をうまく分離できません。 プロトコール、手順などご教授いただけたらと思います。 初歩的な質問で申し訳ございません。

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