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BMDCの培地交換の量について トピック削除
No.10671-TOPIC - 2022/07/29 (金) 21:55:35 - こゆき
現在BMDCを誘導しており、培地交換の際の培地量について疑問があります。カッコ内条件(4.0×10^5cells/2ml/well 12wellプレート)で骨髄細胞を最初に播種し、その後は1.5mlずつ培地交換をしています。浮遊細胞を吸わないように1.5mlずつ培地交換をしています。最初に播種した培地量と培地交換の培地量が異なるのですが、この培地交換方法はおかしいのでしょうか。(フローサイトでは樹状細胞のマーカーが確認できています)
 
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No.10671-4 - 2022/07/30 (土) 00:26:32 - おお
蒔いたときの培地の半量を培地交換するような方法も細胞によっては使われるよ。細胞の分泌物が細胞にとっていい効果をもたらしていることもあるので、全部取っ替えるより細胞の生理状態が安定するといった理屈もある。

(無題) 削除/引用
No.10671-3 - 2022/07/29 (金) 23:19:45 - こゆき
ご返信ありがとうございます。

他研究室のプロトコルを聴くと培地交換の際は全培地除去してから、最初に入れた培地と同じ量を加える(例 2ml播種→2ml培地除去→2ml培地添加)のものも多く、培地を5〜8割で交換するこちらの方法が誤っているのかと気になったため、お聞きしました。 不慣れな部分があり、意図のわからない質問となってしまい、申し訳ありません。

(無題) 削除/引用
No.10671-2 - 2022/07/29 (金) 22:03:03 - わあ
どういう意図かわかりませんが、
12wellは1mlから2mlは範囲なので、細胞の健康状態や実験状況に問題はないはずですよ

BMDCの培地交換の量について 削除/引用
No.10671-1 - 2022/07/29 (金) 21:55:35 - こゆき
現在BMDCを誘導しており、培地交換の際の培地量について疑問があります。カッコ内条件(4.0×10^5cells/2ml/well 12wellプレート)で骨髄細胞を最初に播種し、その後は1.5mlずつ培地交換をしています。浮遊細胞を吸わないように1.5mlずつ培地交換をしています。最初に播種した培地量と培地交換の培地量が異なるのですが、この培地交換方法はおかしいのでしょうか。(フローサイトでは樹状細胞のマーカーが確認できています)

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