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Re:　細胞のロス？ 削除/引用 No.10632-3 - 2022/07/23 (土) 20:59:05 - 細胞 細胞の継代でロスるのは個人の技量がかなり影響します。 一度自分の技量でどれだけ細胞が減るのか、細胞の回収時、遠心後、新しい培地に浮遊させた後などのステップで細胞数を計って確かめてみてはいかがですか？ 1回の遠心でも、遠心速度によっては細胞数は90％くらいになることもあります。 どうぞご参考になさってください。

(無題) 削除/引用 No.10632-2 - 2022/07/16 (土) 16:29:29 - iiii 遠心後の上澄みのアスピレーションをしすぎたか、分注するときによくミックスされてないかが考えられると思います。 アスピレーションするときにちょっとだけ上澄み液を残して、そのちょっと残った上澄みはP200程度のピペットで捨てる。 時間をおいてしまうとチューブの下の方に細胞が落ちてしまうので、再懸濁して混ぜた直後に分注する。 これでいかがでしょうか。

細胞のロス？ 削除/引用 No.10632-1 - 2022/07/16 (土) 15:55:14 - ろ 細胞の継代の際 例えば回収してきた細胞の総数が2.2×10^6cells だったとして 4.4mlにとかしたら5×10^5cells/ml これを1.5mlチューブに入れたら7.5×10^5になるはずというような事をしているのですが、 実際の数値が計算と全然合いません 遠心後の上澄には細胞無さそうなので、アスピレーションか懸濁の仕方が悪いのかなと思うのですが、 アスピレーションや懸濁のコツとかあるでしょうか アスピレーションは上からゆっくり吸ってギリギリを攻めるパターンと、吸いながら途中でチューブを倒して細胞が液面から出ている状態にしてから吸うのの両方しましたがあまり変わりません 懸濁は10mlのディスポピペットか液量少ない時は先切れチップを利用しています

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