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マウス心臓採血 トピック削除
No.10614-TOPIC - 2022/07/11 (月) 17:19:14 - tama
お世話になっております。
マウスから1mL程度、心臓から採血をしたいです。
麻酔後、仰向けに保定してお腹側から刺入し、血液がシリンジ内に流入するまで針を進め、流入してきたら針を固定させて内筒をゆっくり引いています。
注射針は23G,シリンジは1mLです。
現在までに最大500μLほど採血できましたが、それ以上進展がありません。
過去のフォーラムを拝見し、色々と試行錯誤しましたがだめでした。
改善点や、コツなどご教授いただければ幸いです。
よろしくお願いいたします。
 
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No.10614-11 - 2022/07/20 (水) 12:45:16 - bんkl
マウス心臓採血にはマイジェクターは有用と思います。ただ針部分が外せないので、そのまま血液を出すと確実に溶血します。私らは、マイジェクターに入れたまま放置して、血液が大体凝固したら、針にキャップをしてかつ(針先が飛んだ時のことを考慮して)周囲の安全を確保してから、プラスチックシリンジの前方部を大きめのハサミで切って(完全に切る必要ないです、半分くらい切り込みが入れば手で曲げれば口が開くので9血液を1.5mlチューブに出します。

(無題) 削除/引用
No.10614-10 - 2022/07/19 (火) 23:30:56 - mon
私も開胸して右心室から採血しています。いつもぎりぎり1mlとれるぐらいです。

(無題) 削除/引用
No.10614-9 - 2022/07/12 (火) 17:07:17 - そも
私はCO2で安楽死させてから開胸せずに心臓穿刺で採血しています。
採血量は大きさ次第です。経験的には20gくらいだと採血できるのは500-700 uL程度です。

開胸しないで採血、が条件であれば下大静脈から採る選択肢もあります。採血量は心臓と変わらないですし、針先が確認できるのでLPSさんがご指摘されている胸腔内の出血を回収するような事態にはならないというメリットもあります。
Yamazonさんがマイジェクターをおすすめしていますが、針先を外せないので溶血しやすい点は注意が必要かと思います。

(無題) 削除/引用
No.10614-8 - 2022/07/12 (火) 13:08:55 - Yamazon
私も開胸して心臓を露出し、1mL採血しています。
また、通常のシリンジよりもマイジェクターを使用すると血液を回収する際ロスが少なくおすすめです。

(無題) 削除/引用
No.10614-7 - 2022/07/12 (火) 12:21:32 - tama
みなさま

ご回答いただきありがとうございます。
やはり開胸での採血でないと難しいのですね。実験計画書の段階で、開胸しないで採血と記載しましたので躊躇っておりました。上司と相談して開胸を検討します。

(無題) 削除/引用
No.10614-6 - 2022/07/12 (火) 06:29:34 - LPS
1ml ということは全採血と考えていいと思います。ならば、開胸して行った方が確実でしょう。心臓から採血してるつもりで、血管や心臓を傷つけて胸腔内に溜まった血液を抜いているケースが見受けられます。それでも構わないなら別ですが。
それと、マウスの血液は固まるのが早いです。たくさん取ろうとして時間をかけると固まりやすいです。一見、大丈夫のようでも、そこから分離した血漿を凍結融解するとフィブリン塊が見られたりします。注射器を使った採血は、注射器を抜くまで抗凝固剤と均一には混ぜれませんからね。手技があるなら前もってヘパリンを投与したりしても良いです。ヘパリンが問題じゃなければ。

(無題) 削除/引用
No.10614-5 - 2022/07/11 (月) 21:20:46 - cvbnm
答えになりませんが、1mlも必要ですか?簡単ではありません。
必ずしも必要でないなら諦めるのも悪くないと思います。

右室から採血しないと 削除/引用
No.10614-4 - 2022/07/11 (月) 18:11:22 - bんkl
ちゃんと開胸して右室に刺さないと、あまり量採れないと思います。右室から(血液が戻ってくるのを待つために間隔開けながら採血すれば1mlくらいは取れます。

(無題) 削除/引用
No.10614-3 - 2022/07/11 (月) 18:08:02 - AA
私は麻酔下で開胸して穿刺していますが安定して1mlとるというのはかなり難しいのではないでしょうか。
マウスの循環血液量は60-70ml/kgくらいだと思いますので、仮に20gのマウスだとすると1.2-1.5mlくらいで、そこから1mlを吸引仕切るのは結構大変そうに感じます。

(無題) 削除/引用
No.10614-2 - 2022/07/11 (月) 17:40:21 - Sd.Kfz.161/4
開胸して心臓を露出して、穿刺ではだめなのですか?

マウス心臓採血 削除/引用
No.10614-1 - 2022/07/11 (月) 17:19:14 - tama
お世話になっております。
マウスから1mL程度、心臓から採血をしたいです。
麻酔後、仰向けに保定してお腹側から刺入し、血液がシリンジ内に流入するまで針を進め、流入してきたら針を固定させて内筒をゆっくり引いています。
注射針は23G,シリンジは1mLです。
現在までに最大500μLほど採血できましたが、それ以上進展がありません。
過去のフォーラムを拝見し、色々と試行錯誤しましたがだめでした。
改善点や、コツなどご教授いただければ幸いです。
よろしくお願いいたします。

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